6.2. Оборудование для культивирования и питательные среды
Главным необходимым требованием при культивировании является сохранение жизнеспособности нужного организма. Для клеток водорослей наиболее уязвимым моментом является влияние химического или физиче- ского окружения, когда они помещаются в пробирку или чашку Петри. В некоторых случаях это окружение бывает губительным. Чувствительность может быть обусловлена как следствием отсутствия защиты у клеток к хи- мическим процессам, происходящим в среде (например, хелированием клеточных экссудатов), так и растворением в среде токсичных материалов. Эти эффекты обсуждаются во многих работах (Davies, 1983; Stokes, 1983; Price et al., 1988/89).
Чувствительность водорослей к среде обитания заслуживает внима- ния в связи с биологическими пробами на токсичность материалов, поэто- му для изоляции и очистки и, следовательно, для поддержания жизнеспо- собности культуры необходима избыточно высокая концентрация веществ, в противном случае эта среда будет не пригодна для каждой отдельной клетки. В соответствии с рекомендациями Л.Брандта с коллегами (Brand et al., 1981), необходимы многочисленные опытные процедуры, направлен- ные на устранение лаг-фазы при пересеве культуры, что необходимо для определения оценок акклимационного роста. Методы культивирования, сбора и хранения образцов морской воды усовершенствованы в соответст- вии с методикой очистки и экстраочистки, которая сейчас принята в каче- стве стандарта (Guillard, 2005). Исходя из этой методики, необходимо со- блюдать осторожность при приготовлении питательных сред для выделе- ния водорослей. Так как пресная вода содержит очень небольшое количе- ство ионов, выщелачивание элементов и химическая трансформация не представляет особой проблемы, однако остается проблема загрязнения ме- таллами во время автоклавирования (Guillard, 2005).
В то время как температура является фактором, легко контролируе- мым во время манипуляций по очистке, свет не относится к числу таких регулируемых факторов. Этот вопрос рассматривался Л.Брандом для мор- ских фитопланктонных видов, однако эти положения можно отнести и к пресноводным видам. Существуют обзоры об эффекте качества и количе- ства света на культуры динофлагеллят (Guillard, 2005).
