3.1.2. Получение мидийного спата в условиях питомника.
Отбор производителей.
Работы по культивированию личинок мидий и получению спата
целесообразно начинать в периоды массового размножения мидий в
природных условиях: в марте-апреле и сентябре – ноябре. Отбор
моллюсков обычно проводят по внешним признакам: форме и
окраске раковины и темпу роста. Для получения личинок с высоким
темпом роста и высоким уровнем выживаемости, в качестве
производителей отбирают мидий с темно-синей раковиной,
обитающих в относительно чистых акваториях. Производители
должны быть, как минимум, трех размерных классов (например, 40 –
45; 46 – 50; 51 – 55 мм), что требуется для обеспечения необходимого
количества самок и самцов, так как, даже при равном соотношении
полов, часть моллюсков могла отнереститься ранее в природных
условиях.
Температурная стимуляция нереста мидий.
После механической очистки раковин мидий от обрастания, их
промывают в пресной воде, ополаскивают фильтрованной морской
водой, ножницами обрезают биссус и распределяют отдельно по
269
одной в ёмкости объемом 500 мл с профильтрованной морской
водой. Мидий, отобранных в весенний сезон, при температуре воды в
море 8°С, помещают в морскую воду при 17°С. При проведении
опытов в осенний сезон, когда температура воды в море составляет
17°С, мидий, после предварительного охлаждения при температуре 8
– 10°С в течение 2 – 3 час. (без воды), распределяют по ёмкостям с
фильтрованной морской водой температуры 17°С. При более
высокой температуре воды, например, при 22°С, происходит
нарушение процессов мейоза в оплодотворенных яйцеклетках, что
является причиной низкой выживаемости на ранних личиночных
стадиях. Обычно нерест начинается в течение часа от начала
стимуляции; первыми нерестятся самцы, затем - самки. Яйцеклетки в
воде легко различимы, часто оранжевого или розового цвета; после
вымета они зависают в толще воды, а затем оседают на дно.
Сперматозоиды равномерно распределяются по всему объему воды.
Суспензия сперматозоидов молочно – белого цвета.
Оплодотворение.
При оптимальной температуре воды жизнеспособность гамет
сохраняется в течение нескольких часов. Для обеспечения высокой
выживаемости личинок, оплодотворение проводят в течение двух
часов после нереста. Перед оплодотворением с помощью микроскопа
необходимо оценить зрелость яйцеклеток. Яйцеклетки должны быть
без ядер, округлой формы. При проведении индивидуального
скрещивания отбирают яйцеклетки от одной самки и сперматозоиды
от одного самца. В групповом скрещивании количество яйцеклеток
от каждой самки должно быть примерно одинаковым, как и
количество сперматозоидов от каждого самца. Яйцеклетки
подсчитывают в камере Богорова с помощью микроскопа (например,
МБС – 9, увеличение 98), предварительно сконцентрировав их в
объеме 250 мл, отбирают трижды по 1 мл; определяют среднее
значение и умножают на объем суспензии. Количество
сперматозоидов определяют в камере Горяева под микроскопом
(увеличение 200), предварительно обездвижив их в парах формалина,
затем, с учетом разбавлений, подсчитывают количество
сперматозоидов в 1 мл. Отобранные яйцеклетки переносят на сите с
размером ячеи 56 мкм в профильтрованную морскую воду (V = 1 л).
К суспензии яйцеклеток добавляют определенный объём суспензии
сперматозоидов и равномерно перемешивают. При соотношении
яйцеклеток и сперматозоидов 1:10, оплодотворение проходит без
полиспермии. Процесс оплодотворения и эмбрионального развития
мидий контролируют при помощи микроскопа. Через час объем воды
доводят до 10 л и подключают аэрацию. Эмбриональное развитие
проходит при плотности посадки 30 тыс. яйц./л.
Для предотвращения полиспермии, при невозможности
предварительного подсчета половых клеток, через 15 мин. после
оплодотворения, яйцеклетки собирают на сите (размер ячеи 56 мкм),
промывают и переносят в профильтрованную морскую воду с
аэрацией.
Выращивание личинок.
В зависимости от поставленных задач, объем ёмкостей для
выращивания может составлять от 1 до 100 л и более.
Культивирование личинок проводят в профильтрованной морской
воде при температуре 18±2оС и постоянной аэрации. В течение
первых двух недель обмен воды в сосудах с личинками проводят
ежедневно, а затем через сутки при помощи сита с размерами ячеи
меньшими, чем размеры личинок. Также при помощи сита с разными
размерами ячеи проводят сортировку личинок по размерам.
Корм личинкам необходимо выдавать ежедневно, начиная с
трехсуточного возраста. В качестве корма личинкам на стадии
велигера дают смесь микроводорослей Is. galbana + Monochrysis
lutheri концентрации 40 тыс.кл./мл при соотношении клеток 1:1.
Начиная с недельного возраста, в корм личинкам необходимо
включать еще Ph. tricornutum; при этом общая концентрация
водорослей составляет 40 тыс.кл./мл, что по сырой биомассе
соответствует 3,58 мг/л. На стадиях великонхи и педивелигера корм
также состоит из трех видов микроводорослей: Is.galbana + M.lutheri
+ Ph.tricornutum при соотношении клеток 1:1:1 и концентрации 50
тыс. кл./мл, что соответствует сырой биомассе 6,40 мг/л.
Оптимальная плотность личинок, определённая методом
многофакторных экспериментов, на стадии велигера - 10 тыс. лич./л;
на стадии великонхи - 5 тыс. лич./л. «Глазок» появляется у личинок
на стадии великонхи (225 мкм). При длине раковины более 250 мкм
- появляется нога. Размер «глазка» педивелигеров, готовых к
оседанию – 11 х 9 мкм.
271
Оседание.
В природных условиях педивелигеры мидий оседают
преимущественно на нитчатые субстраты, как естественные –
макроводоросли, так и искусственные – веревки, предварительно
вымоченные в морской воде. Они предпочитают оседать в места, с
уже сформированными друзами мидий. Кроме этого, природный
фитопланктон представляет собой сбалансированный по составу
корм. Вероятно, такие условия способствуют быстрому завершению
метаморфоза мидий.
В лабораторных условиях нами пока еще не отработаны
оптимальные условия, необходимые для осаждения педивелигеров. В
экспериментах по изучению наследования качественных признаков у
мидий, оседание педивелигеров продолжалось в течение двух недель.
После выделения первичного биссуса, некоторые ювенильные особи
снова откреплялись и ползали в поисках нового субстрата. В
дальнейшем их темп роста был намного ниже, чем у спата, осевшего
на коллекторы мидийной фермы.
Пример расчёта основных параметров устричного питомника.
Данный пример приводится в качестве иллюстрации расчётов
потребностей в основном оборудовании, корме и фильтрованной
морской воде. Экономическое обоснование минимальной
производительности питомника может сделать фермер, базируясь на
затратах и на схеме приводимых здесь расчётов.
Условимся, что годовая производительность предполагаемого
питомника мощностью 4 млн. штук устричного спата в год, из
которых – 1,5 млн. - для собственного выращивания и 2,5 млн. - для
поставок в другие устричные хозяйства. Учитывая значительные
капитальные затраты, связанные с организацией питомника, можно
полагать, что питомник, производящий 4 млн. штук спата в год, вряд
ли окажется рентабельным.
Оборудование:
•
Баки для личинок объёмом по 500 литров. Конечная
концентрация личинок 2000 экз./л. Поэтому бак будет
содержать 1 000 000 личинок готовых к оседанию.
Учитывая отход личинок во время оседания, нужно
готовить к оседанию 8 млн. педивелигеров. Поэтому
необходимо иметь 16 баков, из которых 8 баков будут с
272
личинками и 8 баков будут подготовлены к пересадке
личинок, то есть они будут залиты профильтрованной
водой.
•
Ванны для осаждения личинок объёмом по 1,8 м3
рассчитаны для внесения 2 млн. личинок. Всего нужно 4
ванны. Вместо ванн можно построить бассейн объёмом
10 м3.
•
Аквариумы на 100 л для кондиционирования
производителей – 2 шт.
•
Устричные коллекторы (дисковые из пластмассы).
Предположим, что на каждую сторону диска садится 50
личинок, то есть всего на диске 100 личинок. В одной
ванне садится 1000 000 личинок, что потребует 10 000
дисков. Всего на один цикл (4 ванны) требуется 40 000
дисков.
Остальное оборудование приведено в описании питомника.
Расчёт потребностей в фильтрованной морской воде.
Используется вода, прошедшая через фильтр с порами 1 мкм.
Ежедневно заполняются 8 баков по 500 литров; ещё 500 литров
используются на мытьё баков и 500 литров на нужды участка по
выращиванию водорослей. Таким образом, суточный расход
составляет 5 м3
Расчёт объёмов выращиваемых кормов.
Приведенные ниже расчёты выполнены на основе
рекомендаций, разработанных в экспериментальном питомнике
ИнБЮМ. Состав корма и его концентрация изменяется в процессе
роста личинок устриц, продолжающегося в течение 4 недель:
1 неделя. Выдаётся ежедневно корм изохризис и хетоцерос
в соотношении 2:1. Концентрация корма в баке с
личинками 100 000 кл/мл. В один бак выдавать: 100 млн.
кл/л х 500 л = 50 млрд. клеток (32,5 млрд. изохризиса и
17,5 млрд. хетоцероса). Если концентрация изохризиса в
культуральной среде 9,8 млн. кл/мл, то для получения 32,5
млрд. клеток нужно взять 3,3 литра культуры.
Соответственно культуры хетоцероса: 17,5 млрд.: 1,8 млн. =
9,7 литра культуры хетоцероса.
273
2 неделя. Выдаётся изохризис и хетоцерос в соотношении
1:1. Концентрация корма в баке с личинками 150 000 кл/мл.
В один бак выдавать 75 млрд. клеток (37,5 млрд. изохризиса
и 37,5 млрд. хетоцероса).
3 неделя. Выдаётся изохризис, хетоцерос и добавляют
дуналиэллу и тетраселмис. Концентрация корма в баке с
личинками 200 000 кл/мл. В один бак выдавать 100 млрд.
клеток: 45 млрд. изохризиса, 45 млрд. хетоцероса, 5 млрд.
дуналиэллы и 5 млрд. тетраселмиса.
4 неделя. Выдают те же водоросли и к ним добавляют
скелетонему или талассиозиру. Концентрация 200-250 000
кл/мл. Всего нужно 100-125 млрд. клеток.
Выше приведены данные по количеству кормов, выдаваемых в
один бак. Выращивание личинок начнётся с четырёх баков, (все
велигеры разместятся в 4 баках). Поэтому данные, полученные для
первой недели, нужно умножить на 4; для последующих двух недель
данные выдачи корма нужно умножать на 6 (в работе 6 баков); для
последней (четвёртой) недели – умножить на 8.
Осаждение личинок будем производить на дисковые
коллекторы, собранные в гирлянды. Гирлянды длиной по 2,5 м
включают 250 дисков диаметром по 100 мм. Гирлянды размещаются
в четырёх ваннах объёмом по 1,8 м3 (длина 3 м; ширина – 1,2 м;
высота – 0,5 м). По ширине ванны устанавливаются 10
горизонтальных рядов гирлянд. По высоте ванны гирлянды
располагаются на четырёх уровнях. Всего в ванне размещается 40
гирлянд или 10 тыс. дисков. В ванну вносят 2 млн. педивелигеров с
глазком, что должно обеспечить прикрепление и метаморфоз 1 млн.
устриц, то есть получение 1 млн. штук спата.
В каждую ванну ежедневно вносится корм (смесь изохризиса,
хетоцероса, тетраселмиса, скелетонемы);0 концентрация водорослей
в ванне до 200 тыс. кл/мл. Объём ванны равен 1,8 м3 (1800000 мл),
следовательно, нужно внести: 1 800 000 х 200 000 = 360 млрд. клеток.
Для получения дневного расхода эту цифру нужно умножить на 4.
Процесс осаждения будет продолжаться в течение 3 - 5 сут.
Структура и оборудование питомника.
После достаточно подробного описания технологии
производства спата в условиях питомника представляется
274
целесообразным дать более точное описание оборудования и
материалов, применяемых в питомниках. Ниже предлагаются два
варианта: 1) питомник, ориентированный на выполнение только
производственных задач и 2) питомник, являющийся подразделением
«Регионального центра марикультуры», который, кроме выполнения
чисто производственных задач, включает и обучение морских
фермеров (практика) и лабораторию контроля качества продукции.
Итак, питомник производительностью 4 млн. штук спата в год
состоит из следующих отделов:
•
водоподготовка (отдельное строение) …….…….....25 м2;
•
содержание, кондиционирование
и нерест производителей, а также осаждение
личинок………………………………….……..…… 20 м2;
•
выращивание личинок …………………………...…50 м2;
•
подращивание спат до 10 мм ……………………... 20 м2;
•
массовое культивирование микроводорослей
(в больших объёмах) и содержание
маточных и стартовых культур…… ……………. . 20 м2;
•
лаборатория для подготовки сред,
микроскопических наблюдений,
контроля биотехнических процессов ……………. 20 м2 ;
•
склад оборудования и материалов ……………… 20 м2.
Итого: ………………………………………………………..150 м2
Спат можно подращивать снаружи здания (в проточных лотках
под навесом). В этом случае понадобится 130 кв. м. крытых
помещений. Второй, третий и четвёртый отделы можно разместить в
одном помещении.
Производственные и бытовые площади питомника,
включающего обучение специалистов и контроль качества
продукции:
•
участок кондиционирования производителей; проведения
нереста и осаждения личинок…………………………...25 м2;
•
выращивание личинок ………………………………......50 м2;
•
подращивание спата……………………………………...30 м2;
•
содержание маточных культур водорослей…….………10 м2;
275
•
наращивание культур…………………………………….20 м2;
•
выращивание водорослей в больших объемах…….…...30 м2;
•
микробиологическая лаборатория…………..…………..20 м2;
•
офис, выполнение «сухих работ»…………….…………15 м2;
•
учебный центр, выполнение «влажных работ»…….….30 м2;
•
бытовое помещение……………………………………...10 м2;
•
склад………………………………………………………40м2.
Итого: 280 м2.
Стоимость здания питомника равна: 1040 грн. х 280 = 291200
грн. Стоимость оборудования приведена в таблице 23.
Финансовые затраты на организацию питомника:
291200 + 361400 = 652600 грн.
