3.4. Измерение объектов
Измерять клетки микроорганизмов в микрометрах можно на фикси- рованных и живых препаратах при помощи шкалы окулярного микрометра – окулярной линейки. У кокков определяют диаметр клеток, у других форм бактерий – длину и ширину.
Окулярная линейка – круглая стеклянная пластинка, по центру кото- рой нанесена шкала делений (50 или 100 делений) общей длиной 5мм. Окулярную линейку устанавливают шкалой вверх на диафрагму окуляра. Ставят препарат и определяют, скольким делениям линейки соответствует длина и ширина клетки. Измеряют не менее 10...20 клеток.
Чтобы рассчитать истинные размеры клеток, определяют цену деле- ния окулярной линейки при помощи объектного микрометра. Последний представляет собой металлическую пластинку в форме предметного стекла с отверстием в центре; в отверстие помещено стекло с линейкой (шкала из 100 делений). Общая длина шкалы объектного микрометра 1мм, величина одного деления 10мкм (0,01мм).
Объектный микрометр помещают вместо препарата на столик мик- роскопа, фокусируют изображение линейки при малом увеличении, затем перемещают в центр поля и меняют объектив на тот, при котором измеря- ли клетки. Перемещая столик микроскопа и поворачивая окуляр, устанав- ливают объектный и окулярный микрометры так, чтобы их шкалы были параллельны и одна перекрывала другую.
Определение цены деления окулярного микрометра проводят по принципу нониуса, т.е. совмещают одну из черт шкалы окулярного микро- метра с чертой объектного микрометра и находят следующее совмещение. Допустим, в двух делениях объектного микрометра (20мкм) умещается пять делений окулярного микрометра, тогда одно деление окулярного микрометра при данном увеличении равно 4мкм (20:5).
Зная, скольким делениям окулярной линейки соответствует длина и ширина изучаемых клеток, умножают цену деления окулярного мик- рометра на эти числа. Вычисленные значения цены делений линейки справедливы только для данной системы окуляр – объектив (Теппер и др., 1993).
Контрольные вопросы 1. Опишите устройство микроскопа. 2. Как определить увеличительную способность микроскопа? 3. Какова максимальная разрешающая способность микроскопа? 4. Перечислите правила работы с микроскопом. 5. Как настроить освещение микроскопа? 6. Чем отличается настройка микроскопа для работы при малом и большом увеличении? 7. В каких случаях используют иммерсионную систему микроскопа? 8. Как измеряют клетки микроорганизмов?
