ПРИЛОЖЕНИЕ 1
Прописи питательных сред, рекомендуемых для культивирования различных групп водорослей
Основная среда Болда (Bold’s Basal Medium–BBM) (Bold, 1949; Bischoff, Bold, 1963) Эта среда подходит для выращивания многих водорослей, особенно хлорококковых, вольвоксовых (особенно родов Chalmydomonas), нитчатой зеленой водоросли Klebsormidium flaccidum (Kutzing) S.Mattox et Blackwell (Floyd et al., 1972), желтозеленой водоросли Heterococcus endolithicus Darl- ing et Friedmann (Darling et al., 1987), эвгленовой водоросли Colacium vesi- culosum Her. (Rosowski, Kurgens, 1973) и цианобактерии Microsystis aerugi- nisa Kutzing (Cole, Wynne, 1974).
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество (мл)
Концентрация в ко- нечной среде (моль) Макроэлементы NaNO
3 25 CaCl
2
?2H
2
O 2,5 10 2,94?10-3
10 1,70?10
-4
MgSO
4
-4 K
2
?7H
2
O 7,5 10 3,04?10 HPO
4 7,5 KH
2
PO
4
10 4,31?10-4 -4 NaCl 17,5 10 1,29?10
2,5 10 4,28?10-4 Щелочной раствор ЭДТА 1 ЭДТА 50 1,71?10-4 KOH 31 5,53?10
-4
Кислый раствор железа 1 FeSO
4
4,98 1,79?10-5 H
2
SO
4
1 Раствор Бора 1 H
3
BO
3
11,42 1,85?10
-4 Раствор микроэлементов 1 ZnSO
4
O 8,82 3,07?10-5 MnCl
2
?7H
2
-6 MoO
3
?4H
2
O 1,44 0,71 7,28?10
4,93?10-6 CuSO
4
?5H
2 O 1,57 Co(NO
3
)
2
?6H
2
O 0,49 6,29?10
-6 1,68?10-6
В 936 мл дистиллированной воды необходимо добавить по 10 мл раствора каждого из 6 макроэлементов и по 1мл каждого раствора микро- элементов, затем автоклавировать. рН конечного раствора - 6,6.
Существует несколько модификаций основной среды Болда: KBBM (BBM +0,25% суркозы +1,0% протеазного пептона) для куль- тивирования штаммов, подобных хлорелле, живущих симбиотически с Pa- ramecium bursaria Focke (Schuster et al., 1990).
128
BBM+GA (BBM+1% глюкоза +0,01М раствор гидролизатов амино- кислот (например, гидролизат казеина) или 0,01М раствор аминокислот (например, пролина, глутамина или аргинина). Эта среда была разработана для культивирования симбионта лишайников Trebouxia (Fox, 1976).
3NBBM (BBM с утроенной концентрацией нитрата) для выращива- ния Anabaena flos-aquae Brebisson ex Bornet et Flahault и Anacystis nidulans Gardner (Thomas, Montes, 1978).
3NBBM+ раствор витаминов (BBM с утроенной концентрацией нит- рата и добавлением трех витаминов) для выращивания Batrachospermum (Ag- hajanian, 1979). Витамины: добавьте 0,125 мкг/л витамина конечном растворе); 0,125мкг/л биотина (5,12?10-10 М B
1
(4,52?10-10 М в в конечном растворе); 0,125мкг/л цианокобаламина (5,12?10-10 М в конечном растворе).
Двойная усиленна среда BBM+стерилизованные зерна пшеницы. Эта среда предназначена для культивирования криптомонад Chilomonas paramaecium Ehr. и Cyathomonas truncata (Fres.) (Kugrens et al., 1987).
Среда AF6 (Kato, 1982; Watanabe et al., 2000)
Среда была предложена в 1982 (Kato, 1982) для выращивания Colacium (Euglenophyceae), но затем стала широко применяться для выращивания во- дорослей, предпочитающих слегка кислую среду. Среда была модифициро- вана М.Ватанабе с соавторами в 2000 году (Watanabe et al., 2000), которые предложили использовать MES буфер и раствор микроэлементов. Среда AF6 используется для выращивания вольвоксовых (Carteria, Gonium, Pandorina, Platydorina, Pleudorina, Pteromonas, Pseudocarteria, Volvox), ксантофитовых (Botrydiopsis arhiza Borzi, Botridium granulatum (L.) Greville), многих крипто- фитов, динофлагеллят (Peridinium) и эвгленовых (Phacus, Euglena).
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) MES буфер - 400мг 2,05?10-3 Цитрат железа 2 1мл 8,17?10
-6 Лимонная кислота 2 1мл 1,04?10-5 NaNO
3
-3 NH
4
140 1мл 1,65?10 NO
3 22 Co(NO
3
1мл 2,75?10-4 -7
MgSO
4
)
2
?6H
2
O 49,4 1мл 1,70?10
-4 KH
2
?7H
2
O 30 1мл 1,22?10
10 1мл 7,35?10-5 K
2
PO
4 HPO
4 CaCl
2
?2H
2
O 5 1мл 2,87?10
-5 10 1мл 6,8?10-5 Раствор микроэлемен- тов (смотри ниже)
1мл
Раствор витаминов (смотри ниже)
1мл
129
Приготовьте маточные растворы. В 950 мл дистиллированной воды растворите сначала MES буфер, цитрат железа и лимонную кислоту, затем добавьте другие растворы, доведя конечный объем до 1л. рН раствора - 6,6. Автоклавируйте.
Раствор микроэлементов для среды AF6
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Na
2
ЭДТА? 2H
2 O - FeCl
3
2?6H2O - 5г 1,34?10
-5 0,98г 3,63?10-6 MnCl
2
?4H
2 O ZnSO 4
- 0,18г 9,10?10-7 -7 CoCl
2
?7H
2
O O - 0,11г 3,83?10
20 1мл 8,41?10-8 Na
2
6?6H MoO
4
2
12,5 1мл 5,17?10
-8
Приготовьте первоначальные маточные растворы. В 950 мл дистил- лированной воды растворите ЭДТА, потом каждую соль, и затем добавьте по 1мл каждого маточного раствора.
Раствор витаминов для среды AF6
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Тиамин?HCl (витамин B
1
- 10мг 2,96?10
-8 ) Биотин (витамин H) 2 1мл 8,19?10
-8 Пиридоксин?HCl (ви- тамин B
6
1 1мл 5,91?10-9 ) Цианокобаламин (ви- тамин B
12
1 1мл 7,38?10
-10 )
Приготовьте маточные растворы. В 950 мл дистиллированной воды растворите раствор тиамина, и потом добавьте по 1 мл 2 маточных раство- ров. Простерилизуйте с помощью фильтрации. Храните в холодильнике (Andersen et al., 2005).
Среда для культивирования диатомовых водорослей (Cohn, Pickett-Heaps, 1988)
Среда разработана для выращивания пресноводной диатомовой во- доросли Suriella, однако ее можно использовать для выращивания и других видов диатомей. Ее используют для выращивания Navicula cuspidata Kutz., Nitzschia, Pinullaria, Stauroneis.
130
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Концентрация в конечной среде (моль) Ca(NO
3
O 70,85 1мл 3?10-4 K
2
)
2
?4H HPO
4
2
54,44 1мл 4?10
-4 MgSO
4
O 24,65 1мл 1?10-4 Na
2
?7H
2 SiO
3
?5H
2 O FeSO
4
?7H
2
O 20мл, рН 8,5 1мл ~3?10-4
0,278 1мл 1?10
-6 MnCl
2
?4H
2
O 0,02 1мл 1?10-7 Почвенная вытяжка - 50мл - Раствор витаминов - 1мл -
В 900 мл дистиллированной воды растворите все компоненты. Дове- дите конечный объем до 1л. Стерилизуйте методом тиндализации. Охла- дите и затем добавьте витамины и NaHCO
3
. Доведите рН раствора до 6,75. Стерилизуйте с помощью фильтра.
Раствор витаминов для культивирования диатомовых водорослей
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Тиамин?HCl (витамин B
1 ) - Биотин (витамин H) - 1г 2,97?10-6
1г 4,09?10
-6
Никотиновая кислота (нианацин)
-6
Цианокобаламин (ви- тамин B
12
- 1г 8,12?10
1 1мл 7,38?10
-10 ) бавьте В по 950 1мл мл каждого дистиллированной маточного раствора. воды растворите Доведите витамин конечный B 1
и объем затем до до- 1 литра. Стерилизуйте с помощью фильтра и храните в холодильнике (An- dersen et al., 2005).
Среда BG-11 для синезеленых водорослей, модифицированная (Allen, 1968; Allen, Stainer, 1968; Rippka et al., 1979)
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Раствор цитрата железа 1мл Лимонная кислота 6 1мл 3, 12?10
-5 Цитрат аммоната железа 6 1мл ~3?10-5 NaNO
3
-2 K
2
- 1,5г 1,76?10 HPO
4
?3H
2 O MgSO 4
40 1мл 1,75?10-4 -4 CaCl
2
?7H
2 O O 75 1мл 3,04?10
36 1мл 2,45?10-4 Na
2
?2H
2 CO
3 20 MgNa
2
EDTA?2H
2
O 1 1мл 1,89?10-4
1мл 2,79?10
-6 Раствор микроэлементов 1мл
131
Используемое ко- личество
Приготовьте маточный раствор цитрата железа (растворите цитрат железа в 1л дистиллированной воды) и другие маточные растворы. К 900 мл дистиллированной воды добавьте 1мл раствора цитрата железа, потом добавьте остальные компоненты. Автоклавируйте. рН финального раство- ра - 7,4.
Раствор микроэлементов для среды BG-11 (раствор микроэлементов A5+Co)
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) H
3
BO
3 - MnCl
2
?4H
2
O 2,86г 4,63?10-5
- 1,81г 9,15?10
-6
ZnSO
4
?7H
2
O -7 CuSO
4
O - 0,22г 7,65?10
79 1мл 3,16?10-7 Na
2
?5H
2 MoO
4
?2H
2 O - Co(NO
3
)
2
?6H
2
O 49,4 0,391г 1,61?10
-6 1мл 1,70?10-7
К 950 мл дистиллированной воды добавьте ЭДТА и другие компо- ненты, доведя финальный объем до 1 литра (Andersen et al., 2005).
Среда Чу-10 (Chu, 1942)
Среда Чу-10 является наиболее популярной из 17 питательных сред, предложенных С.Чу (Chu, 1942). Она представляет собой синтетическую среду, повторяющую по своему составу озерную воду, однако она лишена хелаторов, витаминов и микроэлементов (исключая железо). Она широко используется для культивирования водорослей, включая зеленые водорос- ли, диатомеи и цианобактерии (Chu, 1942). Многие синтетические среды были разработаны на основе среды Чу-10.
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Ca(NO
3
-4 K
2
)
2
40 1мл 2,44?10 HPO
4 5 MgSO
4
O 1мл 2,87?10-5 25 1мл 1,01?10-4 Na
2
?7H CO
3
2
20 1мл 1,89?10
-4 Na
2
SiO
3 25 FeCl
3
1 мл 2,05?10-4 0,8 1мл 4,93?10
-6
В 950 мл дистиллированной воды растворите каждый компонент. Доведите конечный объем до 1л и автоклавируйте. lotella Среда meneghiniana Чу-10 + Kutzing 0,1мг/л и витамина C.cryptica B
Reimann 12
используется (Schultz, для Trainor, выращивания 1968).
Cyc-
132
Среда WC (Guillard, Lorenzen, 1972)
Эта среда представляет собой модификацию среды Чу-10 и среды Райта для выращивания криптофитов (WC=Wright’s cryptophyte). Среда WC без добавления буфера используется для выращивания желтозеленых водорослей Tribonema aequale Pascher, Botridium becherianum Vischer, Vau- cheria sessilis (Vaucher) De Candolle, Ophiocytium maius Nageli и эустигма- тофитовой водоросли Eustigmatos magnus (B.Petersen) Hibberd. Среда также применяется для культивирования хлорококковых и вольвоксовых (Anki- strodesmus, Chlorella, Chlamydomonas), десмидиевых (Spondylosium, Cos- marium, Staurastrum), диатомовых (Asterionella, Cyclotella, Sellaphora, Ste- phanodiscus) и цианобактерии Microcystis (Andersen et al., 2005).
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Буфер (использовать только один буфер!) Глициглицин - 500мг 3,78?10
-3
Трис - 500мг 4,13?10
-3 NaNO
3 CaCl
2
?2H
2
O 85,01 1мл 1,00?10-3
36,76 1мл 2,50?10
-4 MgSO
4
?7H
2 O NaHCO
3
36,97 1мл 1,50?10-4 -4 Na
2
12,60 1мл 1,50?10 O 28,42 1мл 1,00?10-4 K
2
SiO
3
?9H HPO
4
2
8,71 1мл 5,00?10-5 Раствор микроэлемен- тов
1мл
Раствор витаминов 1мл
В 900мл дистиллированной воды растворите один из буферов. До- бавьте остальные компоненты и доведите конечный объем до 1 л. рН ко- нечного раствора - 7,6-8,0. Автоклавируйте.
Раствор микроэлементов для среды WC
Компонент Маточный раствор (г/л дистиллированной во- ды)
Используемое ко- личество
Концентрация в ко- нечной среде (моль)
Na
2
ЭДТА? 2H
2
O - 4,36г 1,17?10-5 FeCl
3
?6H
2 O CuSO 4
O - 3,15г 1,17?10-5 10,0 1мл 4,01?10-8 ZnSO
4
?5H
2
O 22,0 1мл 7,65?10-8 CoCl
3
?7H
2 ?6H
2 O MnCl 2
O 10,0 1мл 4,20?10-8 180,0 1мл 9,10?10-7 Na
2
?4H
2
O 6,0 1мл 2,48?10-8 H
3
MoO
4
?2H
2 BO
3
- 1г 1,62?10-5
133
К 950 мл дистиллированной воды добавьте все необходимые компо- ненты, доведите конечный объем до 1 л. Автоклавируйте.
Раствор витаминов для среды WC
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Тиамин?HCl (витамин B
1 ) - Биотин (витамин H) 0,5 100мг 2,96?10
-7
1мл 2,05?10
-9 Цианокобаламин (ви- тамин B
12
0,5 1мл 3,69?10-10 )
В 950 мл дистиллированной воды растворите витамин B
1
, добавьте 1 мл маточного раствора и доведите конечный объем до 1 литра. Стерили- зуйте с помощью фильтрации и храните в холодильнике (Andersen et al., 2005).
Среда Фраквила (Fraquil medium) (Morel et al., 1975) Эта среда была предложена для изучения взаимодействия микроэле- ментов с пресноводным фитопланктоном. Основные соли в этой среде те же, что и в среде WC, однако концентрации нитрата, фосфата и силиката уменьшены. Эта среда используется для изучения эффекта внесения ме- таллов на рост, доступность питательных веществ, фотосинтетическую ак- тивность и морфологию Scenedesmus quadricauda (Turpin) Brebisson (Ru- eter, Ades, 1987), Anabaena (Rueter, 1988), Asterionella ralfsii var.americana Korner (Genesemer, 1990), Selenastrum capricornutum Printz (Errecalde, Campbell, 2000).
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) CaCl
2
?2H
2
O 36,80 1мл 2,50?10
-4 MgSO
4
?7H
2 O NaHCO
3 Na
2
SiO
3
?9H
2 O 37,00 1мл 1,50?10-4 12,60 1мл 1,50?10-4 3,55 1мл 1,25?10
-5 NaNO
3 K
2
HPO
4
8,50 1мл 1,00?10-4 1,74 1мл 1,00?10
-5 Раствор витаминов 0,5мл - Раствор микроэлемен- тов
1мл -
К 900 мл дистиллированной воды добавьте по 1мл раствора каждой соли, 0,5 мл раствора витаминов и 1мл раствора микроэлементов. Доведите конечный объем до 1л.
134
Раствор витаминов для среды Фраквила
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Тиамин?HCl (витамин B
1
- 200мг 2,96?10-7 ) Биотин (витамин H) 1,0 1мл 2,05?10
-9 Цианокобаламин (ви- тамин B
12
1,1 1мл 4,06?10-10 )
К 950 мл дистиллированной воды добавьте витамин B
1
и по 1мл ка- ждого маточного раствора. Доведите конечный раствор до 1л. Стерилизуй- те с помощью фильтрации. Храните в холодильнике.
Раствор микроэлементов для среды Фраквила
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое количество
Концентрация в конечной среде (моль) CuSO
4
O 0,249 1мл 9,97?10-10 (NH
4
?5H
2 )
6
Mo
7
O
24
?4H
2 O 0,265 CoCl
3
?6H
2
O 0,595 1мл 2,14?10
-10
1мл 2,50?10
-9 MnCl
2
?4H
2 O ZnSO 4
4,550 1мл 2.30?10-8 -9 Na
2
?7H
2
O 1,150 1мл 4,00?10 ЭДТА? 2H
2 O FeCl
3
?6H
2
O - 1,860г 5,00?10-6
- 0,122г 4,51?10
-7
К 950 мл дистиллированной воды добавьте по 1мл каждого маточно- го раствора. Важно осаждения гидроксида добавить железа. Na
Доведите 2
ЭДТА перед конечный FeCl
объем 3
для предотвращения до 1л (Andersen et al., 2005).
Среда С (модифицированная) (Ichimura, 1971; Watanabe et al., 2000)
Эта среда была разработана для культивирования видов Closterium (от- сюда С среда) и представляет собой модификацию среды для Volvox (Provasoli, Pintner, 1960) для выращивания десмидиевых водорослей. Эта среда хорошо подходит для культивирования хлорококковых водорослей, некоторых воль- воксовых (например, Chlamydomonas, Carteria, Chloromonas, Hafniomonas, Haemotococcus), десмидиевых (Cosmarium, Cylindrocystis, Gonatozygon, Meso- taenium), некоторых нитчатых зеленых водорослей (например, Ulothrix, Uro- nema, Draparnaldia, Hyalotheca, Hydrodictyon, Stigeoclonium) (Watanabe et al., 2000). Ниже перечислены несколько вариантов модификаций этой среды.
135
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Концентрация в конечной среде (моль) Трис-буфер - 0,50г 4,13?10-3 KNO
3
-4 Ca(NO
3
- 0,10г 9,89?10 O - 0,15г 6,35?10-4 Na
2
?-
)
2
?4H
2
50 1мл 1,63?10-4 глицерофосфат?5H
2 MgSO
4
O O 40 1мл 1,62?10-4 K
2
?7H HPO
4
2
1,74 1мл 1,00?10
-5 Раствор микроэлементов 3мл - Раствор витаминов 1мл -
К 900 мл дистиллированной воды добавьте трис-буфер, затем остав- шиеся компоненты. Доведите объем раствора до 1л и автоклавируйте. рН конечного раствора - 7,5.
Модифицированный раствор микроэлементов для среды С (Provasoli, Pintner, 1960; Watanabe et al., 2000)
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое количество
Концентрация в конечной среде (моль) Na
2
ЭДТА? 2H
2 O FeCl
3
?6H
2
O - 1,000г 8,06?10
-6
-6 MnCl
2
O - 0,194г 2,15?10
36,00 1мл 5,46?10-7 ZnCl
2
?4H
2
-7 Na
2
10,44 1мл 2,30?10 MoO
4
? 2H
2 O CoCl
3
?6H
2
O 12,62 1мл 1,56?10-7
4,04 1мл 5,09?10
-8
К 950 мл дистиллированной воды добавьте ЭДТА и потом раствори- те каждую из солей. Доведите объем раствора до 1л.
Раствор витаминов для среды С
Компонент Маточный раствор
(г/л дистиллирован- ной воды)
Используемое ко- личество
Концентрация в конечной среде (моль) Тиамин?HCl (витамин B
1
- 10мг 2,97?10-8 ) Биотин (витамин H) 0,1 1мл 4,09?10-10 Цианокобаламин (ви- тамин B
12
0,1 1мл 7,38?10
-11 ) В 950 мл дистиллированной воды растворите витамин B
1
и затем до- бавьте по 1мл каждого маточного раствора. Доведите объем раствора до 1л. Стерилизуйте с помощью фильтрации и храните в замороженном со- стоянии (Andersen et al., 2005).
136
Используемое количество
Среда CB (среда С с рН=9,0 с использованием бицина вместо трис- буфера). Используется для культивирования видов Microcystis (Watanabe et al., 2000).
Среда Csi (среда С с рН=7,0 с использованием 500мг HEPES вместо трис-буфера+100мг/л 3,52?10-4 Na
2
SiO
3 М). Эта среда предназначена с концентрацией в конечном растворе для выращивания диатомовых во- дорослей (Otsuki et al., 1987; Watanabe et al., 1987; Soma et al., 1993) и раз- личных видов бентосных водорослей (Takamura et al., 1988, 1989).
Среда CT (среда С с рН=8,2 с использованием 400мг TAPS-буфера). Среда применяется для выращивания штаммов Anabaena (Li et al., 1998) и осцилляториевых цианобактерий (Suda et al., 2002).
Среда CYT (1 литр среды С+1г дрожжей+2г триптона). Эта среда способствует хорошему росту бесцветной криптомонады Chilomonas pa- ramaecium Ehr. (Erata, Chihara, 1987).
Среда для проведения теста на загрязненность (Watanabe et al., 2000)
Тестовая среда B-I: 1г протеазного пептона Тестовая среда B-II: 5г экстракта дрожжей Тестовая среда B-II: 5г пептона+ 3г мясного экстракта Тестовая среда B-IV: 1г глюкозы+ 1г пептона Тестовая среда B-V: 0,5 ацетата натрия+ 0,5г глюкозы +0,5г трипто- на +0,3г экстракта дрожжей
Тестовая среда YT: 1г жрожжей+2г триптона Эти среды готовятся путем добавления органических компонентов к 1литру питательной среды для водорослей (которая будет использоваться для выращивания водорослей). Для олиготрофных бактерий нужно суще- ственно уменьшать концентрации органических компонентов. В жидкую питательную среду необходимо добавить органические вещества, в бульон добавить агар (10-15г агара на 1 л бульона), нагреть до растворения агара. После растворения агара раствор автоклавировать и разлить в чашки Пет- ри (Andersen et al., 2005).
Среда Кнопа (г/л, применяется в разведениях 1?2, 1?4, 1/
10
, для зеленых водорослей): Ca MgSO
(NO
3
)
2
– 0,25
KH KCl 2
PO – 4
0,08 ? 4
– 7H
0,06 2
O – 0,06
Fe
2
Cl
6
– одна капля 1% раствора
137
Среда Прата (г/л, для хранения коллекции культур):
KNO K
2
HPO
3
– 4
0,10 – 0,01 MgSO
4
?7H
2
O – 0,01 Агар-агар – 1,2% FeCl
3
?6H
2
O – 0,001
Среда Тамия (г/л, применяется в различных разведениях для зеленых водорослей):
KNO MgSO KH FeSO Раствор 2 PO 3
4
?7H 4 – ?7H
4
5,0
– 1,25 2
O – 2,50
микроэлементов 2
O – 0,003
– 1 мл, ЭДТА – 0,037 Раствор микроэлементов (г/л): H
3
BO
3
– 2,86; MnCl
2
?4H
2
O – 1,81; ZnSO
4
?4H
2
O – 0,222; MoO
3
– 176,4 мг/10л; NH
4
VO
3
– 229,6 мг/10л
Среда Громова (мг/л, универсальная среда, применяемая в разных разведениях):
KNO
3
– 100 K
2
(NH
4
)
6
?Mo
7
O
24
?4H
2
O – 1
MgSO ZnSO MnSO CuSO Na
HPO
3
BO
4
4
4
4 ?7H
?5H
3 ?7H
?7H 4
?4H
– 66,7
2
2
2
2 O O 2 O O O – – – – – 0,022 0,079 33,3
1,81
2,63
FeSo CaCl Co ЭДТА (NO
4
2
?7H ?2 – 3 ) 10 H
2
2
?H
2 O O – 2
– O 9,3 1,2
– 0,02
Агар-агар – 1,5%
Среда Гиндака (г/л, применяется в разведениях 1?4 и 1/8 для интенсивного культивирования водорослей):
(NH
4
)
2
CO
3
– 3,0 (NH
4
ZnSO
4
?7H
2
O – 0,025 )
2
SO
4
– 0,3
MnSO
4 MgSO
4
?7H
2
O – 0,006
KH H FeSO
3
BO 2
PO
4
3
?7H
– 4
– 0,06 2,5 2
O – 5,0
CaCl
2
?2H
?7H
2
2 O O – – 0,04 0,04
Na CuSO CoCl ЭДТА 2
MoO
2
4 ?6H
?5H – 4
0,37
?2H
2
2 O O – 2
– O 0,002 0,008
– 0,005
138
Среда Шенборна (г/л, для Euglena viridis):
NH MgSO
4
NO
4
?7H
3
– 1,0
2
O – 0,2 KH
2
PO
4
– 0,2 CaCl
2
?2H
2
O – 0,1 MnCl
2
?4H
2
O – 0,0001 Fe
2
Cl
6
?H
2
O – 0,0025
Среда Бристоль в модификации Голлербаха (г/л, для почвенных водорослей):
NaNO KH MgSO CaCl NaCl 2
PO 2 – 3 – 4
?7H
0,05 – – 0,05
0,25 0,25
2
O – 0,15
Fe
2
Cl
6
– следы (3 капли 1%-го раствора)
Среда Артари (г/л, для гипергалобных водорослей):
NaCl – 116,0 MgSO KNO K NaHCO Железо-аммиачные 2
HPO
3
4 – ?7H
4
3
2,5 – – 2
O – 50,0
0,2
1,0
квасцы – следы Относительная плотность cреды – 1,1; pH 6 – 7 Эту среду, разбавленную до относительной плотности 1,02, можно исполь- зовать для выращивания солоноватоводных и морских водорослей.
Среда Дрю (г/100мл, для азотфиксирующих синезеленых водорослей):
K
2
HPO
4
– 0,02 MgSO CaCl FeCl Вода 3 2 дистиллированная – – 4
– следы следы
0,02
– 100мл.
