8. Обесклеивание икры
Если икра карпа инкубируется во взвешенном состоянии, ее предварительно обесклеивают.
Предложены 2 метода устранения клейкости. Первый основывается на способности определенных веществ задерживать переход клейкого вещества в активное состояние до стадии, когда клейкость исчезает. Таким веществом является раствор поваренной соли при концентрации 6 г/л. Второй заключается в устранении клейкого слоя с помощью соответствующих растворенных в воде реактивов. В качестве растворяющего вещества можно применять мочевину [4].
Один из первых препаратов, предложенных для обесклеивания икры, был фермент гиалорунидаза. Клейкость икры связана с гиалуроновой кислотой - важной составной частью соединительной ткани, участвующей в формировании оболочек яйцеклеток. Студенистый слой оболочки является производным фолликулярного эпителия. Клейкость может быть устранена гиалорунидазой - ферментом, расщепляющим гиалорунидат. Гиалорунидазу получают из семенников домашнего скота. Активность гиалорунидазы, выделенной из семенников разных видов животных, различна. Водная вытяжка из свиных семенников может полностью обесклеивать карповую икру за 30-40 минут. Вытяжка из говяжьих семенников не обеспечивает полного обесклеивания. Поэтому при работе с растворами гиалорунидазы, полученной из говяжьих семенников, окончательного обесклеивания икры достигают дополнительной обработкой ее раствором танина.
Запасной раствор танина готовят следующим образом: 10 г танина растворяют в 1 л дистиллированной воды. Раствор танина можно хранить в холодильнике в течение 7-10 дней. Для приготовления рабочего раствора танина запасной раствор разводят водой в 100 раз (100 мл на ведро воды).
Для приготовления обесклеивающего раствора можно использовать либо свежие семенники, либо порошок ацетонированных семенников. Свежие семенники освобождаются от соединительнотканной оболочки и измельчаются на мясорубке. Полученную массу заливают физиологическим раствором (8,5 г хлористого натрия на 1 л дистиллированной воды) из расчета 3 л раствора на 1 кг очищенных семенников. Смесь размешивают и настаивают при комнатной температуре не менее 3 ч. Затем жидкую фракцию отцеживают через марлю. Эта смесь является запасным раствором, который хранится в холодильнике в течение 7-9 дней.
Из порошка ацетонированных семенников (ПАС-Г) запасной раствор готовится аналогичным образом: 50 г порошка настаивают в 1 л 0,85%-ного физиологического раствора в течение 3 ч, затем отцеживают через марлю.
Для приготовления рабочего раствора гиалорунидазы запасной раствор разводят чистой прудовой или ручьевой водой в 10-20 раз (0,5-1 л запасного раствора на ведро воды).
В таз с икрой после добавления спермы (3-5 см3 на каждый литр икры) и тщательного перемешивания добавляют небольшое количество рабочего раствора гиалорунидазы. В этом растворе происходит оплодотворение и обесклеивание икры. Икру в тазу постоянно осторожно перемешивают пером. По мере набухания икры в таз приливают новые порции раствора гиалорунидазы, с таким расчетом, чтобы над икрой был слой раствора толщиной 0,5-1 см. Процесс обесклеивания продолжается 40-50 мин.
