СОЛОНОВОДНЫЕ КОЛОВРАТКИ - BRACHIONUS PLICATILIS
Это мелкие коловратки - (0,1 - 0,3 мм). Средний вес 1 млн коловраток составляет 1,5 г. Они поедают фитопланктон, бактерий, дрожжи. Амиктические самки размножаются партеногенетически, откладывая (2N) яйца (т.е. с двойным набором хромосом). Миктические (1N) самки (т.е. с одним набором хромосом) дают яйца, из которых выходят самцы (N) или участвуют в спаривании, откладывая полноценные покоящиеся (2N) яйца. Самцы живут 2 - 3 суток. Самки - до 2 недель. Половозрелыми становятся через 1 - 1,5 суток. Яйца тяжелее воды. Коловраток культивируют в емкости 3 - 100 литров, добиваясь их плотности в 100 - 300 экземпляров на мл. Желательны очень слабая продувка и боковое освещение. Культура выходит на стационарную численность за 5 - 7 суток. Температура культивирования - комнатная, однако коловратки могут существовать при температуре от 15 до 35 °С, но оптимум приходится на 26 - 28 °С. Культивируются при любой освещенности, но лучше если продолжительность освещения составляет 8 часов в сутки. При верхнем освещении (без продувки) они концентрируются в слое 1 - 2 см у поверхности воды, достигая численности 1000 экз./мл (при люминесцентных лампах и мощности света 3 - 5 тыс лк), иногда до 7 - 10 тыс. экземпляров на мл. Желательно рН 7,1 - 7,6 (возможно до 9,5). Соленость выдерживают от 1 до 90 %, но лучше 3 – 25 %о (NаС1), для азово-черно-морских коловраток оптимум составляет 12 – 15 %. При культивировании в среде с соленостью до 6 %о в культуре коловраток появляются инфузории. Обычно коловраток культивируют при солености 25 %: это 1 столовая ложка NаС1 на 1 л воды или 83 мл насыщенного раствора NаС1 (300 %) на 1 литр воды. Некоторые авторы советуют в 1 литре воды средней жесткости растворять 19 г NаС1 и 6 г Nа2SO4. Хорошие результаты культивирования (при солености воды в 25 %) можно получить при замене 1/3 - 1/4 коловраток с водой на свежую воду такого же объема (83 мл насыщенного раствора NаСl на 1 л культуры сценедесмуса). Добавка водорослей повышает кормовые качества коловраток и ускоряет темпы их размножения и откладывания яиц. Размер пищевых частиц для коловраток не должен превышать 12 - 15 мкм (размер хлореллы - 3-4 мкм, клеток пекарских дрожжей - 6 мкм). Норма кормления - 40 мг на 1 л сухой биомассы.
Высокую численность коловраток можно получить при внесении дрожжей в количестве от 100 мг/л до 1 г/л. Недостаток и избыток корма приводит к голоданию коловраток (сухая масса 1 млн клеток: пресноводная хлорелла - 10 мкг; пекарские дрожжи - 28 мкг). Кормят коловраток пекарскими или сухими кормовыми рожжами. Спиртовые дрожжи необходимо заморозить, тонко порезать и хранить в морозильной камере до приобретения ими коричневого цвета. Использование свежих спиртовых дрожжей вызывает гибель коловраток, покоричневевших - размножение. При концентрации дрожжей 1 г на 1л воды в культиваторе может затухнуть. Для более равномерного производства бактерий при внесении дрожжей в концентрации 1 г на 1 л (на 2 недели) в культуру добавляют антибиотики: граммицидин - 0,02 - 0,2 мг/л (поддерживаемая численность коловраток 160 – 190 шт/мл); ампициллин - 25 - 250 мг/л (поддерживаемая численность коловраток 110-310 шт./мл); тетрациклин: 0,1; 1; 10 мг/л (поддерживаемая численность коловраток соответственно: 180; 245; 150 шт./мл). При культивировании коловраток частое удаление бактерий со стенок и дна культиватора не желательно. При заполнении нового культиватора необходимо внести осадок бактериальных хлопьев из старого культиватора, содержащего покоящиеся яйца. В новом культиваторе до обрастания бактериями стенок культиватора численность внесенных коловраток практически не увеличивается. Для получения массового выхода коловраток из яиц, находящихся на дне культиватора в бактериальном осадке, необходимо внести в культиватор 1 мл маточного (1 мг/л) раствора даларгина на каждый литр объема культиватора. Для повышения пищевой ценности коловраток, их отцеживают через газ N 76, выдерживают несколько часов (2 - 3 часа) в воде без корма (для освобождения кишечников), после чего их кормят в течение 1 - 2 часов кормами, богатыми витаминами и иными важными для роста личинок
соединениями, а затем отфильтровывают через газ No 76 и скармливают личинкам. В данном случае в качестве корма для коловраток (в качестве наполнителей содержимого кишечника коловратки) используют пасту морских водорослей (хлореллы, монохризиса) содержащих ш 3 высоконенасыщенные жирные кислоты (ш 3 ВНЖК), благодаря чему выживаемость личинок увеличивается в 2 раза. Коловраток можно в течение 1 суток кормить суспензией гомогенизированного жира катрана, богатого сиЗВНЖК. Жир печени катрана получают путем отстаивания в соленом растворе гомогената печени в течение 12 часов (при температуре не более 30 °С). Жировую эмульсию готовят перемешивая в миксере в течение 3 минут 5 г жира катрана, 1 г яичного желтка и 100 мл воды. Эта эмульсия пригодна для внесения в 60 л - емкость с коловратками, с одновременной добавкой 12 г дрожжевого корма. Для получения покоящихся яиц, коловратку перестают кормить и снижают температуру до 12 - 14 °С, при этом необходимо убрать люминесцентное освещение. Культуру сливают, осадок на дне культиватора отфильтровывают через бумажный фильтр, высушивают в темноте на воздухе и хранят вместе с фильтром. Перед инкубацией яйца промораживают 1 - 2 месяца, выдерживая их при температуре -5...-10 °С, но можно и не промораживать. Яйца для инкубации, в количестве до 1 г на 1 л помещают в соленую воду (25 %о). Затем температуру повышают до оптимальной (28 °С) и обеспечивают слабую продувку воздухом. Выклев из яиц происходит через 36 - 48 часов. Пустые оболочки всплывают, развивающиеся яйца тонут. Коловратку сразу кормят хлореллой или пекарскими дрожжами, внося корм до начала инкубации. Для отбора половозрелых коловраток используют газ No 64, для тотального отбора - газ No 76. Для личинок, держащихся и питающихся у дна (барбусы, акантофтальмусы, сомики), коловраток выращивают при солености воды в 25 % о,- отцеживают их через газ No 76 и непосредственно переносят к личинкам. Следует учитывать, что при резкой смене солености (из 25 %о - в пресную воду) коловратки опускаются на дно и гибнут через 30 - 60 минут. Для получения коловратки, держащейся в толще пресной воды, что необходимо для питания личинок большинства рыб, культуру коловраток необходимо распреснять. Для этого коловратку отцеживают через газ No 76, не обсушивая на газе, и переносят в 50 мл той же культуры, содержащей 24 %о солей. Далее к ней добавляют 50 мл культуры водорослей (хлорелла, монохризис) с такой же концентрации солей, после чего в течение 12-24 часов распресняют культуру коловратки путем добавления по каплям 800 мл аквариумной воды. Воду в распресняющейся культуре необходимо слабо аэрировать: при этом происходит перемешивание воды с разной соленостью (выравнивание солености). При 3 %о солености в присутствии микроводорослёй коловратки живут и размножаются. По мере надобности коловраток из распресненной культуры отцеживают через газ No 76 и скармливают личинкам. Предварительно распресненная до солености 3 %о коловратка, пересаженная в пресную воду, перестает размножаться, но живет и плавает в толще воды до 3 суток. Голодная, а также накормленная дрожжами или бактериями коловратка обладает положительным фототаксисом. Коловратка, накормленная водорослями, стремится от света и концентрируется в затененных участках аквариума, там же где и личинки ряда харациновых рыб, не выносящие яркого света. Для кормления личинок рыб, держащихся у самой поверхности, распресненную культуру коловраток, накормленных водорослями, помещают на яркий свет, после чего отцеживают через газ и скармливают личинкам. Такие коловратки держатся у самой поверхности воды за счет пузырьков кислорода, образующегося в их пищеварительной системе благодаря фотосинтезу на свету, съеденных коловратками водорослей. Можно просто слегка обсушить коловраток на газе и аккуратно перенести их на поверхность воды.
