Искусственное воспроизводство африканского сома.
Итак, самки и самцы африканского сома достигли половозрелости, они способны дать зрелые половые продукты. Однако выброс зрелых половых продуктов (это переход на V стадию зрелости) происходит с наступлением ряда внешних факторов, которые отличаются у рыб разных видов. Например, у толстолобиков — это прогрев воды, резкий подъем уровня воды и сильное медленное течение большой реки. С чем это связано? Это характеристики половодья рек Дальнего Востока, толстолобики обоих полов совершают миграцию против течения на расстояния более 100 км по русли большой реки, там происходит окончательное созревание половых клеток, нерест, оплодотворение, а далее икринки плывут по течению реки вниз. Во время этого сплава икринки развиваются.
Если таких условий нет, то производители не начнут нерестовую миграцию, нереста не будет. Как получать потомство от такого ценного объекта для рыбоводства как толстолобики в пруду, где нет тока воды? Ученые выяснили, что необходимые внешние факторы приводят в итоге к выработке у производителя т.н. гонадотропных гормонов, которые и вызывают завершение созревания половых клеток и гонад. Ос ваясь на этих знаниях, ученые разработали методы искусствен рыб необходимых гормонов. Часто для этого используют гипофизы других половозрелых рыб, но есть и известные конкретные гормоны, выпускаемые промышленностью, которыми инъецируют рыб. Для каждого вида необходимы исследования для определения эффективности использования того или иного препарата,
Освоив методы искусственного вызывания созревания, аквакультура получила мощнейший механизм для масштабного развития. Рыбовод может провести нерест в удобное для производства время, более того - проводить нерест не в традиционный для данного объекта сезон года Исследователи Выясняют, через какое время после инъецирования созреют самки и самцы, знает примерно, сколько икры можно получить от средней самки маточного стада. Также рыбовод знает, сколько примерно личинок выживет из икры. Образно это можно изложить таким образом: питомник знает, что в пятницу приедет покупатель на определенную партию личинок, рыбовод делает расчеты, отбирает нужное количество производителей в начале недели и ... к нужному времени нужная по количеству партия личинок будет готовой. Но, для этого рыбовод должен иметь необходимые ЗНАНИЯ и уметь их применять.
В общем, все указанное мы освоили и для африканского сома в условиях Узбекистана. Сам метод хорошо знаком рыбоводам республики на примере толстолобиков, определенную информацию мы нашли в литературе с помощью Интернета, адаптировали это все к нашим условиям и получили хороший результат. Теперь рыбоводы Узбекистана могут уверенно искусственно воспроизводить африканского сома
Для стимулирования овуляции у африканского сома в мировой аквакультуре используют разные гонадотропные препараты, например, дезоксикортикостерона ацетат (дозировка 50 мг/кг тела рыб), синтетический LHRH (10-50 g /кг тела), вводимый вместе с пимозидом (дозой 5 мг/кг тела рыбы), препарат Оваприм (0,5 мл/кг массы тела) (Janssen, 1987; De Leeuw et al., 1985; Sharaf, 2012). Однако, чаще всего используют гипофиз зрелого карпа и других карповых рыб. Доза использования ацетонированных гипофизов - 4-4,5 мг/кг массы тела рыб (Hogendoom, Vismans, 1980; Huisman, Richter, 1987). Самцов можно не инъецировать, но, все-таки, лучше их тоже инъецировать (дозы инъекций возможны в количестве 0,25-0,3 от инъекций для самок), в том числе для того, чтобы резко увеличить количество семени у самцов. В наших опытах, как и в некоторых других малых рыбопитомников Узбекистана в последние годы, используют именно ацетонированные гипофизы карпа (рис. 7). Отобранных самок и самцов следует инъецировать раствором гипофиза карповых рыб.
Рисунок 7: Приготовление гипофизарной инъекции
Гипофиз заготавливают у диких рыб на озерах осенью или весной. Питомники республики освоили метод заготовки гипофиза у прудовых зрелых карпов. Гипофиз полностью высушивают в ацетоне (Рисунок 7). В одном пузырьке хранят гипофизы одного вида рыб, схожего размера, пойманных в одни сроки. Порядок применения гипофиза: • Взвесить рыб-производителей, чтобы знать биомассу, на которую надо пригото
вить гипофизарные иньекции. Рассчитать необходимое количество гипофизов (по массе рыб) (1). Для надежности можно взять гипофиза на 10% больше рассчитанного количества. Отвесить нужное количество гипофизов. Перетереть гипофизы (сначала лучше разломать гипофизы на мелкие части, а потом перетереть в ступке до мелкодисперсного состояния / пыли) (2). Если этого не сделать, то частицы гипофиза будут закупоривать иглу при инъекции. Это следует делать в помещении, чтобы ветер не разнес образовавшуюся пыль. Порошок гипофиза следует разбавить в воде (3). Для этого можно использовать слабый раствор соли, менее концентрированный раствор чем «физиологический» (6 г поваренной соли в 1 л воды) достаточен (например, обычная питьевая вода). Но можно использовать и пресную воду. Удобно взять такое количество воды, чтобы 1 мл приходился на 1 кг массы тела рыб. Если рыбы крупные (более 2,5 кг), то можно брать воды из расчета 0,5 мл на 1 кг массы тела рыб. В чашку, в которой будут растворять гипофиз, вливать часть отобранного количества воды, перемешивать, по мере растворения добавлять порциями оставшееся количество воды. Желательно постоянно перемешивать готовящийся раствор (пестиком) для лучшего растворения. В итоге получится мелкодисперсная суспензия. Некоторые рыбоводы пропускают готовую суспензию через фильтр (например, шелковую ткань, мельничный газ), чтобы избавиться от крупных взвесей, которые, напомним, могут закупорить иглу при инъекции. Из чашки раствор гипофиза берут шприцем непосредственно для инъецирования рыб (4). Готовый раствор используют сразу после приготовления или помещают в холодильник на короткий период времени. Гормоны гипофиза устойчивы в воде. Для африканского сома достаточна одна инъекция. Следует продумать время инъецирования, чтобы избежать, например, овуляции в неудобное время. Для этого ориентируются на температуру воды.
Рисунок 8 - Инъецирование самки сома препаратом гипофиза карпа
Рекомендуемая доза инъекции – 4 мг гипофиза/кг массы тела рыбы. Следует рассчитать количество препарата, который надо вводить конкретной рыбе. Инъекции лучше делать утром или вечером для уменьшения стресса рыб. Разные рыбоводы вводят шприц или у основания грудных плавников, или в брюшную полость или в спинную часть тела, Самым эффективным инъецирование будет в брюшную полость (рис. 8). Для инъецирования несколько спускают воду из бассейнов с рыбами, непосредственно перед этим наполняют водой второй бассейн для содержания инъецированных рыб. Рыбу вылавливают сачком из первого бассейна, аккуратно вынимают из воды, вводят ей дозу гипофизарной инъекции и пересаживают во второй. Важно не перепутать инъецированных и неинъецированных рыб.
Во время воспроизводственной кампании следует постоянно регистрировать (каждый час) температуру воды в бассейнах. Важным вопросом при проведении искусственного воспроизводства является время овуляции после инъецирования. Если рыбовод будет пытаться получать икру намного раньше или намного позже времени, оптимальной для овуляции (вымета икры), то икра будет некачественной. Уровень оплодотворения у икринок, отцеженных ранее оптимального периода обычно низкий, а процент неправильно развивающихся икринок высокий. Процент нормально развивающихся икринок будет даже равен нулю, если отцеживание проводят слишком рано, т.е. сразу или Вскоре после появления первых свободно вытекающих икринок. Также качество икры падает, если ее отцеживают слишком поздно (Hogendoorn, Vismans, 1980). Общая зависимость времени овуляции после инъекции усамок афри
ле инъекции у самок африканского сома от температуры воды приведена в таблице 1 (Janssen, 1987). Обратим внимание, что время, когда обнаруживаются несколько свободно вытекающих икринок, несколько отличается от момента массовой овуляции (когда следует начинать отцеживание).
Таблица 1. Оптимальное время для отцеживания икры у сома после инъекции гипофизом
Зная температуру воды, рыбовод по данным таблицы определяет время, когда следует проверить готовность рыб к отдаче зрелых половых продуктов. В расчетное время воду в бассейне спускают так, чтобы можно было уверенно и быстро извлекать самок.
Настоятельно советуем все питомникам! Все данные (размеры рыб, количество введенного препарата) следует тщательно записывать в рабочий журнал. Простой анализ этих данных и данных по температуре воды позволит очень быстро выработать самую эффективную методику воспроизводство в конкретном рыбопитомнике.
Перед отцеживанием икры самок следует отловить и поместить на стол. Голову обматывают влажным полотенцем (тряпкой). Далее рыбу переворачивают и начинают отцеживание. При отцеживании следует достаточно сильно давить на брюшко. Икринки вытекают часто склеившись в кучки и могут приклеиваться к стенкам сосудов, куда их выдаивают. Если отцеживание проводят в оптимальное время, то требуется меньшая сила надавливания на брюшко для выдаивания икринок, при этом масса икры будет меньше. Если оптимальные сроки отцеживания прошли, то у выдаиваемой икры больше масса. Форма икринок при выходе из генитального отверстия также позволяет определять оптимальные сроки отцеживания. Если форма икринок не сферическая, а слегка плоская в жидкости, и ядра не видны у анимального полюса, то рыба готова к отцеживанию.
Зрелую икру выдаивают в сухой тазик (рис.9). В настоящее время принято собирать в один тазик не более 200-250 г икры, так как оплодотворение малых порций гораздо более эффективно. Отметим, что успокоительные препараты используют только для больших рыб (более 3 кг массы тела), мелких рыбаки обычно удерживают и без препаратов.
Рисунок 9 - выдаивание зрелой икры у сома
У самцов извлекают гонады. Это делают или несколько заранее, или после получения икры. Самцов обездвиживалот, вскрывают и вырезают гонады. Гонады очищают от жира и пленок, обсушивают бумагой. Очищенные гонады помещают в чашки Петри, их можно содержать в холодильнике короткое время, можно использовать сразу. Если гонады поместить в раствор соли 0,9 % (NaCI) и содержать в холодильнике, то оплодотворяющая способность сохранится несколько часов. В общем надо всячески ограничить соприкосновение гонад с водой, даже несколько капель воды активируют спермии, которые после этого способны оплодотворять в течение нескольких секунд.
Для оплодотворения икры от 3-4 самок достаточно гонад от самца такого же размера. Для получения спермиев гонаду пропускают (руками) через сито с ячеей 0,5-1 мм. Разрезают гонады острым ножом (скальпелем), кусочки отжимают, протирают через сито на икру (рис. 10). Для оплодотворения 250 г икры около 0,5 – 0,7 мл спермы достаточно. Сперму и икру перемешивают осторожными качаниями тазика в течение 5-10 секунд. После того, как сперму распределили по всей икре, добавляют около 50 мл воды и продолжают перемешивать. Осторожные покачивания и потряхивания тазика продолжают 20-30 секунд. Позже добавляют еще некоторое количество воды в тазик. В течение последующих 5 минут оплодотворенную икру промывают и очищают. У африканского сома икра клейкая, для получения лучших рыбоводных показателей икру надо обесклеить. Для этого в тазик добавляют молоко и перемешивают несколько минут (рис. 11). В это время убирают остатки тканей, отростков, с помощью которых в природных условиях икринки прикрепляются к субстрату (Clay, 1979). После этого икру помещают в инкубационный аппарат.
Рисунок 10- Извлечение гонады у самцов и рассечение для получения спермы
Рисунок 11 - Оплодотворение икры (слева) и обесклеивание оплодотворенной икры (справа)
