5.3. Заготовка гипофизов
Для инъекций используют гипофизы сазана, карпа, леща, карася весенней или осенней заготовки. При заготовке гипофизов рыб руководствуются следующими правилами: нельзя брать гипофиз от неполовозрелых рыб и только что отнерестившихся рыб. Лучшим периодом заготовки гипофизов является преднерестовая миграция рыб. Собирать нужно гипофизы от каждого вида рыб в отдельную емкость.
Для заготовки гипофизов лучше использовать живую рыбу. Но могут быть с успехом применены гипофизы, заготовленные от рыб, хранившихся в течение суток в холодильнике при температуре 1-3 °С.
Расположение гипофиза у рыб разных видом имеет свои особенности (рис. 9). Это следует учитывать при их извлечении. Извлечение гипофиза проводят на специальном столе.
Рис. 9 Расположение гипофиза у различных рыб: а - судака; б - леща
Перед заготовкой гипофизов у живой рыбы следует перерезать жабры для обескровливания. После этого прокалывают затылочные кости и срезают верхние кости черепа. При работе с карпом или сазаном, имеющим тонкую соединительную плёнку, после перерезки продолговатого мозга удаляют головной мозг и извлекают гипофиз. У леща и карася гипофиз расположен в костном углублении и закрыт плотной соединительной плёнкой. Эту плёнку нужно удалить и затем извлечь гипофиз. Гипофиз извлекают осторожно, чтобы не нарушить его целостности. Извлечённый гипофиз освобождают от покрывающей соединительной плёнки, осторожно подхватывают специальным инструментом снизу и погружают в сосуд с ацетоном. Ацетон должен полностью покрывать гипофизы. В этой предварительной порции ацетона гипофизы содержат около 1 ч. Затем ацетон выливают, а гипофизы помещают в склянку, в которой объем ацетона должен в 15 раз превышать объем помещенных гипофизов. Эту порцию ацетона называют первой. При этом применяют свежий, ранее не использованный, химически чистый, безводный ацетон. Через 12 ч первую порцию ацетона сливают и заменяют новой порцией также ранее не использованного ацетона. Во второй порции ацетона гипофизы выдерживают 6-8 ч, затем извлекают и раскладывают на фильтровальную бумагу для просушки. Сушат препараты, при комнатной температуре не допуская попадания прямых солнечных лучей. Ни в коем случае нельзя подогревать гипофизы, так как при этом разрушается гонадотропный гормон.
Высушенные гипофизы укладывают в сухие, герметически закрывающиеся пробирки с указанием вида рыбы и даты сбора.
Хранят гипофизы в герметично закрытых пробирках. После использования части гипофизов, пробирки с оставшимися гипофизами вновь герметично закрывают. Открывать пробирки с гипофизами можно только в сухих помещениях (например, в лабораториях). Нельзя открывать пробирки с гипофизами в очень влажных помещениях (например, в инкубационных цехах).
Хранить гипофизы свыше двух лет нежелательно, хотя при соблюдении правил хранения активность гипофизов сохраняется до 5 лет.