9. Инкубация икры
Обесклеенную икру карпа инкубируют в аппаратах Вейса, аппаратах ВНИИПРХа, аппаратах "Амур" и др.
В 8-литровый аппарат Вейса помещают 500-600 тыс. оплодотворенных икринок, в аппарат ВНИИПРХа, объемом 150-200 л - до 1500 тыс. шт., в универсальный аппарат "Амур" - 4500 тыс. шт. икринок.
Поступление воды в аппараты регулируют таким образом, чтобы икра медленно перемешивалась, не застаивалась и не выбрасывалась током воды из сосуда.
Продолжительность развития икры карпа до выхода из оболочек эмбрионов зависит, прежде всего, от температурных условий (табл. 4). Для развития икры и выклева необходимо определенное количество тепла. Для карпа это 60-80 градусо-часов.
Таблица 4 Влияние температуры на продолжительность развития икры карпа
Контроль инкубации состоит в наблюдении за режимом водоподачи, температурным и газовым режимом, ходом эмбриогенеза и удалении погибшей икры.
Необходимо обратить внимание на важное обстоятельство, которое надо учитывать при использовании заводского способа получения личинок карпа.
Икра рыб в процессе эмбрионального развития проходит ряд критических периодов. В эти периоды наблюдается повышенная чувствительность эмбрионов к различным абиотическим факторам среды (температуре, газовому составу воды, механическому воздействию и др.) [17].
Критическими периодами в развитии икры карпа, как и у большинства нерестящихся весной рыб, являются следующие стадии:
- начало дробления до морулы мелких клеток,
- гаструляция,
- стадия перед выклевом;
- период выхода зародыша из оболочки.
Причиной возникновения критических периодов являются смены форм обмена веществ и перестройка организма зародыша. Критические периоды характеризуются замедлением большинства физиологических процессов и снижением их резистентности. Исключение составляет дыхание, которое во время критических периодов усиливается.
Во время прохождения зародышами критических периодов даже незначительные отклонения условий среды от экологического оптимума вызывают среди них заметную гибель. После прохождения критического периода гибель эмбрионов наблюдается не сразу, а спустя некоторое время, чаще - перед наступлением следующей стадии развития. Вместе с тем не всякую повышенную гибель зародышей следует относить за счет критических периодов. Увеличение смертности зародышей может быть обусловлено отмиранием неоплодотворенных яиц. Помимо этого критические периоды отождествляют с моментами реализации морфофизиологических дефектов, полученных по наследству от родителей или возникших в результате влияния неблагоприятных факторов. Видимым эффектом этих периодов является повышенная гибель зародышей и личинок [8].
Во время инкубации для определения процента оплодотворенной икры, её качества проводят анализы на стадии от 4-8 бластомеров до ранней морулы. На этой же стадии оценивают качество икры по нормальному дроблению. Пробы икры, не менее чем в трех повторностях, просматривают под микроскопом (МБС-10 или аналогичном). Образование разномерных, асимметрично расположенных бластомеров свидетельствует об аномальном развитии икры [17].
В рыбоводной практике вместо процента оплодотворения чаще определяют процент развития - по относительному количеству жизнеспособных икринок примерно через сутки после осеменения. Для этого небольшую порцию икры помещают в чашку Петри. Отсчитывают подряд 100-200 икринок и затем учитывают количество мертвых (побелевших) икринок. Разность между количеством проанализированных икринок и количеством погибших икринок даст количество жизнеспособных. Доля этих икринок от всего количества всех проанализированных, выраженная в процентах и будет показателем процента развития. При нормальных условиях инкубации расхождение в величине этих двух показателей (процента оплодотворения и процента развития), как правило, невелики.
При хорошем качестве половых продуктов оплодотворяемость составляет обычно более 85%, без учёта патологии развития [7]. У недоброкачественной икры иногда бывает высокий процент оплодотворения, но ее развитие идёт не нормально. Поэтому ход эмбриогенеза постоянно контролируют, просматривая икру под микроскопом на различных этапах развития. На каждом из них могут быть обнаружены характерные аномалии, зависящие как от качества икры, так и от условий ее инкубации. Учет отхода икры проводят после прохождения стадии гаструляции, так как эта стадия является наиболее уязвимой к воздействию факторов внешней среды, и сопровождается повышенной гибелью икры. Повышенная гибель эмбрионов наблюдается перед выходом их из оболочки и во время этого процесса, что связано с серьезной перестройкой обмена у эмбрионов. Во все критические периоды развития эмбрионов необходимо тщательно следить за стабильностью абиотических факторов и оберегать икру от различных механических воздействий.