7.4. Получение половых продуктов и инкубация икры

Сбор икры и спермы. Икру и сперму  у производителей получают путем отцеживания с применением анестезирующих веществ. В качестве анестезирующих средств применяют соединения эфира, производные барбитуратовой кислоты, альдегидов, моноуридов, уретанов и др. Наиболее доступным и достаточно эффективным является хинальдин. Его применяют в концентрации 1:10 000 – 1:50 000. Раствор можно считать эффективным, если усыпление форели происходит в течение 1-2 мин и возвращение к нормальному состоянию – через 2-5 мин после помещения в проточную воду.

Раствор готовят следующим образом: 1 мл хинальдина разводят в 10-20 мл этилового спирта или ацетона и смесь заливают в емкость с 4-5 ведрами воды (45-50 л).

Икру отцеживают в сухой эмалированный или пластмассовый сосуд с марлевой салфеткой. В один сосуд собирают икру от 5-10 рыб с таким расчетом, чтобы икра занимала не более 2/3 емкости. Затем икру осеменяют спермой не менее 3 самцов, которую отцеживают непосредственно на икру или вначале в отдельные сухие стаканчики (бюксы), предварительно убедившись в ее хорошем качестве. Чтобы не задерживать процесс осеменения отцеживание икры и спермы следует проводить параллельно. При этом качество спермы у самцов может быть определено заранее, поскольку они созревают на 1-1,5 мес раньше, чем самки. При правильном содержании самцов доброкачественность спермы сохраняется в течение длительного времени. Время отцеживания икры и спермы до их смешивания не должно превышать 5-10 мин.

Икру и сперму осторожно, но тщательно перемешивают пучком перьев или рукой, затем приливают воду или оплодотворяющий раствор и сразу же перемешивают. В этот момент и происходит процесс оплодотворения- проникновение сперматозоида в икринку через микропиле .

В качестве оплодотворяющих растворов используют раствор Хамора, состоящий из 6 г хлористого натрия, 0,2 г хлористого кальция и 4,5 г мочевины, растворенных в 1 л чистой пресной воды. В Японии широко используют для этих целей физиологический раствор 0,85 %-ный  раствор  NaСl и оплодотворяющий раствор, содержащий 9,04 г/л NaCl, 0,24 г/л КС1 и 0,26 г/л СаС12), а также изотонический раствор NaCl с добавлением молока.

Оплодотворяющие растворы в несколько раз увеличивают подвижность сперматозоидов и время открытия микропиле, т.е. способствуют повышению степени оплодотворяемости икры. После добавления воды или оплодотворяющего раствора икру оставляют в покое на 3-5 мин и затем начинают отмывать от полостной жидкости, остатков спермы и органических примесей. Для этого периодически сливают воду после перемешивания икры и добавляют свежую воду. Воду приливают в сосуд по его стенкам, чтобы не подвергать нежную икру в начале эмбрионального развития механическим воздействиям. Отмывка длиться до тех пор, пока икра не станет чистой и икринки не будут прилипать к стенкам и дну сосуда. Прилипание икринок связано с усиленным всасыванием воды под оболочку икринки, то есть прохождением процесса набухания.

Кроме отцеживания производителей вручную существуют и другие способы получения половых продуктов, например при помощи воздуха. Для этого гиподермическую иглу соединяют с велосипедным насосом и вводят ее ниже брюшных плавников в полость тела самки. Туда постепенно нагнетают воздух, и созревшая икра свободно выходит через генитальное отверстие. После освобождения полости от икры воздух осторожно удаляют через трубку из тела путем отсасывания. Таким же методом получают и молоки, только трубку вводят в половое отверстие, и сперма поступает в пробирку.

Отмытую икру сливают в тазы и оставляют в них в течение 2-3 ч для завершения  процесса ее набухания. При отсутствии проточной воды периодически (через 20-30 мин) заменяют воду в тазах. При наличии водопровода воду через резиновый шланг подают на дно емкости с икрой. Набухание икры следует проводить при рассеянном свете в затемненном помещении и в полном покое. В результате набухания объем икринки увеличивается на 15-20 %, а масса – на 16 %. Удобно проводить набухание в двойных тазиках, вкладываемых один в другой. Внутренний сосуд имеет перфорированное дно.

Если икра предназначена для перевозки в другие хозяйства, то период набухания должен быть увеличен до 2 ч.

Инкубация икры. Ее осуществляют в специальных инкубационных аппаратах, которые делят на 2 группы – горизонтального (лоткового) и вертикального типов.

У аппаратов горизонтального типа рамки с икрой расположены последовательно в горизонтальной плоскости, вертикального типа – в вертикальной плоскости. Наиболее распространенными в форелевых хозяйствах являются лотковые аппараты системы Аткинса, Шустера, Вильямсона,  ропшинские и др.

В инкубационных аппаратах горизонтального типа на 1 м2 площади размещают до 45-60 тыс. икринок форели при расходе воды 20-40 л/мин на 100 тыс. икринок.

Аппарат Коста представляет собой ящик, который может  изготовляться из дерева, глазированной глины, листового железа. На внутренней стороне ящика приблизительно на высоте 5 см от дна имеются выступы, на которые кладется деревянная рамка, обтянутая металлической сеткой с ячеей 18х3,5 мм. На рамке в один слой размещают икринки форели и лосося. Аппараты Коста обычно устанавливают на подставках в лестничном порядке в несколько групп. В каждую группу входят 4-6 аппаратов, снабжающихся водой от одного крана. Вода, поступающая в верхний аппарат, проходит над икрой и через сливной носик  поступает в ниже расположенные аппараты. Рабочая емкость аппарата составляет 2-2,5 тыс. икринок, расход воды 0,6 л/мин. Аппарат прост в изготовлении и обслуживании. Недостаток в его малой мощности  (рис.).

Аппарат Шустера (калифорнийский) состоит из двух ящиков, выполненных из листового железа. Наружный ящик (50 х30 х 18 см) имеет глухие стенки и дно. Внутренний ящик (40 х 29 х 12 см)имеет дно из металлической сетки с ячеей 18х3,5 мм. Он вставляется в наружный таким образом, чтобы его сливной носик вдвигался в сточный носик наружного ящика. Вода из крана поступает в наружный ящик (в промежуток 10 см между стенками ящиков), а затем снизу – во внутренний ящик, омывает на пути лежащие на сетчатом дне икринки и сбрасывается вверху через сливной носик. Аппараты Шустера, как и аппараты Коста, устанавливаются в лестничном порядке группами. В каждую группу входит не более 5 аппаратов. При расходе воды 2-3 л/мин на группу икра, лежащая в нижних аппаратах, обеспечивается необходимым количеством кислорода. Мощность  составляет 5-6 тыс. икринок лосося, расход воды 1 л/мин (рис. ).

Иногда используют аппараты, размеры которых увеличены. Размеры наружного ящика в них составляют 100 х 60 х 18 см, а внутреннего – 80 х 58 х 12 см. Площадь аппарата увеличивается в четыре раза, а мощность достигает 20-24 тыс. икринок  лосося.

Аппарат Рюккель-Вацека. Имеет нескколько больший размер сравнительно с аппаратом Шустера (56 х 45 х 19 см) и соответственно большую мощность по икре 20-40 тыс. икринок, а также круговую циркуляцию воды, которая создается благодаря наличию кроме сетчатого дна еще  сетчатой и нижней части боковых стенок. Это позволяет лучше омывать икринки. Расход воды в аппарате составляет 4 л/мин. Применяется в Чехословакии и других западных странах (Купка, 1958; Костомаров, 1958).

Аппарат Аткинса. Представляет собой деревянный ящик размером 1,6 х 0,35 х 0,4 м. Конструктивно близок к лотковому аппарату. Икра инкубируется в 4 стопках, состоящих из 15-20 рамок размером 32 х 32 см каждая. Каждая рамка вмещает в один слой 2,5-3,0 тыс. икринок. В аппарат можно загружать до 200 тыс. икринок. У него две противоположные стороны бортиков каждой рамки сплощные, а две другие имеют вырезы перпендикулярно току воды. Расход воды в аппарате 12-15 л/мин (1-1,5 л/с на 1 млн. икринок). Пред вылуплением личинок для уменьшения их плотности часть рамок вынимают и помещают в запасные лотки (рис. ).

Аппарат Вильямсона представляет собой деревянный или бетонный желоб с 3-6 отделениями. Длина до 6 м, ширина 0,4 и высота 0,5 м. Перегородки, образующие отделение, установлены так, что одна из них, находящаяся ближе к притоку воды, не доходит до дна желоба на 5 см, а другая, находящаяся ближе к вытоку, наглухо закрывает дно желоба, но не доходит до верхнего края на 5 см. Таким образом, поступающая их крана в аппарат вода циркулирует в каждом отделении по вертикали (сверху вниз или снизу вверх) через рамки, равномерно омывая икринки, и сбрасывается через сливной носик. В каждое отделение помещают по 7 рамок. На каждую рамку размером 45 х55 см помещают в один слой 5 тыс. икринок лосося (рис. ). Нижняя рамка находится на расстоянии 6-7 см от дна.

У одной торцовой стенки происходит водоподача, у другой – сброс воды. У задней торцовой стенки помещается решетка, предохраняющая вынос икры. Икра инкубируется на рамках, уложенных  стопками. Желоба можно устанавливать с зависимым водоснабжением, стыкуя их по два или по три с торцовых сторон. Мощность аппарата зависит от числа отделений и составляет 100-200 тыс. икринок. Расход воды с тремя отделениями 5-15 л/минн, с шестью – 10-30 л/мин. Обычно устанавливают спаренно.

Лотковый аппарат американского типа. Изготовляется преимущественно из дерева (рис.) Размер лотка 4,8 х 0,35 х 0,170 м (на наших заводах 3,0 х 0,5 х 0,25 м) с 4 рамками (700 х 350 и 600 х 495 мм). Одна рамка вмещает 8-19 тыс. икринок форели. Подача и сброс  размещены в противоположных концах лотка. В 15 см от начала и конца лотка вставляют вертикальные предохранительные сетки с ячеей 2 мм. Расход воды в аппарате 6-8 л/мин .

Лотковый инкубационный аппарат шведского типа. Состоит из стеклопластикового лотка длиной 2240, шириной 490, высотой 215 и глубиной 165 мм. В инкубационном лотке устанавливают четыре инкубационных ящика размером 470х 470 мм, полезной площадью 0,14 м2 каждый. Инкубационный лоток площадью 0,84 м2 снабжен вертикальным уровенным стояком с верхним сливом воды и защитным экраном. Инкубационные ящики имеют перфорированное дно и наклонную стенку. Вода проходит через перфорированное дно, омывает икринки. а затем уходит через верхнюю перфорированную зону стенки ящика.

Каждый инкубационный ящик вмещает от 8,5 до 10,5 тыс икринок, а сам инкубационный лоток – от 34 до 42 тыс. икринок. В аппаратах такого типа удобно проводить все операции с икрой, а также выдерживать свободных эмбрионов и подращивать личинок до полного перехода на активное питание. Аппараты можно располагать один над другим спаренно (два сверху, два снизу). Расход воды составляет 0,005 л/с на 1 тыс. икринок или от 0,17 до 0,2 л/с на 1 инкубационный лоток.

Ропшинский лотковый аппарат простой в изготовлении, легкий в обслуживаниии, состоит из лотка размером 107 х 50 х 23,5 см. Лоток прикрывается крышкой. Икру размещают на 4 рамках , устанавливаемых одна над другой. В аппарат загружают до 20 тыс. икринок (по  5 тыс. шт. на каждую рамку. Аппараты устанавливают ступенчато в 2-3 яруса. Расход воды составляет 0,1-0,2 л/с (рис. ).

Аппараты вертикального типа. В настоящее время инкубационные аппараты вертикального типа приобрели большое распространение в промышленном рыбоводстве. Из аппаратов вертикального типа широко используются "Энваг", "Риттай", "Стеллажи", аппараты Вейса, ИВТМ и ИМ. Аппараты вертикального типа более экономичны по использованию воды, площади. и обьема инкубационного помещения. На 1 м2 инкубатора можно разместить до 600-1000 тыс. икринок. Расход воды можно уменьшить до 4-5 л/мин на 100 тыс. икринок.

Инкубационный аппарат ИВТ представляет собой затемненный двухсекционный шкаф этажерочного типа, внутри которого в специальных гнездах расположены собственные инкубационные аппараты – кюветы с рамками, которые  опираются на роликоопоры. Каждая секция имеет независимую водоподачу. При извлечения любого аппарата водоснабжение не нарушается. Вода подается сверху, проходит последовательно через все  секции аппарата и отводится в канализацию. Икра в ИВТ размещается на сетках рыбоводных рамок инкубационных аппаратов. В ИВТ предусматривается как инкубация икры, так и кратковременное выдерживание  вылупившихся эмбрионов.

Инкубационный аппарат ИВТМ (модернизированный)

Инкубационный аппарат ИВТМ представляет собой двустворчатый шкаф, внутри которого в специальных гнездах на роликоопорах  расположены собственно инкубационные аппараты – кюветы с рамками (рис.). Аппарат вмещает 2 стопки кювет по 7 шт. Норма загрузки в аппарат – 280 тыс. икринок. Размер кювета 600х 400х 80 мм, площадь ее 0,38 м2. Общий расход воды равен 6-10 л/мин. Общая масса аппарата 180 кг, габариты 750х 945х 1530 мм. Принцип тока воды в аппарате сохранен горизонтальный. Из приемной секции вода через перегородки поступает в камеру , затем поступает под рыбоводную рамку с икрой и, проходя через наклонную предохранительную сетку, стекает в сливной желоб, из него через каналы попадает в водоприемную камеру ниже расположенной кюветы. Для очистки и мойки кювета имеется специальное отверстие, После вылупления инкубационные рамки вынимают, некоторое время выдерживают личинок в кюветах, а затем пересаживают в бассейны.

Инкубационный аппарат ИМ (конструкции А.Н. Канидьева) состоит из трубчатой рамы-каркаса, в котором размещаются 10  емкостей для икры (по 5 шт. в каждой секции).Каждая емкость состоит из двух цилиндрических сосудов, вложенных один в другой. Внутренний сосуд, имеющий сетчатое дно из нержавеющей сетки с ячейками 2х 2 мм, предназначен для многослойного размещения инкубируемой икры форели или лосося. Сетчатое дно внутреннего сосуда отстоит на 1,5-2,0 см от основного днища внешнего сосуда. В центре последнего имеется жестко закрепленная уровенная труба, которая служит для сбора отработанной воды и подачи ее в нижележащую емкость. Для предохранения выноса личинок из аппарата на трубу надевают сетчатый колпак с ячеей 1,5-2 мм, диаметр которого на 1,5-2,0 см больше трубы (рис.).

Оплодотворенную и промытую икру размещают на сетчатом дне внутреннего сосуда вокруг водосливной трубы 10-15 слоями толщиной 6-8 см. Общее количество икры, входящее в 1 емкость, достигает 30 тыс. шт. икринок. Мощность аппарата 300 тыс. икринок. Для каждой вертикальной секции из 5 емкостей имеется свой водоподающий кран. Вода поступает на крышку емкости, стекает с нее  и проходит между стенками емкостей, проходя снизу вверх через слой икры, сливается через оградительную сетку в трубу, из которой попадает уже на крышку нижележащей емкости. Из нижней, последней емкости вода поступает в поддон, а из него уходит в канализацию. Аппарат компактен, удобен в эксплуатации. Выдвижение каждой емкости из каркаса производят независимо от других и позволяет вести контроль за развивающейся икрой и проводить профилактическую обработку икры. Аппарат можно изготавливать из листового железа, стеклопластика или алюминия.

Установлено, что принципиально новая конструкция инкубационного аппарата, позволяющая имитировать естественные условия инкубации икры лососевых рыб в восходящих токах воды, как в нерестовых гнездах, дает возможность значительно снизить отход икры, уменьшить расход воды и производственную площадь в 6-10 раз и сократить трудовые затраты в 5 раз по сравнению с лотковыми аппаратами.

Инкубационный аппарат "Риттай" состоит из прямоугольных кювет ,расположенных одна над другой. Размер кювет 60 х 58 х 8,5 см. В каждой кювете имеется неглубокая сетчатая рамка, расположенная внутри нее. Дно приподнято на 1,5 см над основанием кюветы. Аппараты монтируют группами вертикально. Вода, питающая инкубационный аппарат, поступает в верхнюю кювету со стороны задней стенки, проходит через сетчатое дно внутренней рамки и омывает икру, затем переливается через ее переднюю стенку и отводится по каналу в заднюю часть аппарата, откуда поступает в расположенный ниже аппарат. Инкубационные аппараты "Риттай" размещают вертикально по 10 шт. в ряд. Каждый аппарат рассчитан на инкубацию 10 тыс. икринок кеты.

Вертикальный аппарат  "Стеллажи", которые можно размещать в виде стеллажей или шкафов.

Аппарат Вейса. Предназначен для инкубации икры, в первую очередь, карпа и сигов, хотя в нем можно инкубировать обескленную икру судака, леща и щуки. Представляет собой цилиндр из стекла (оргстекла), сужающий с одной стороны на конус, в конце которого вставляется корковая или резиновая пробка. В центр пробки вставляется трубка, на которую надевается водоподающий шланг. В нем также можно успешно  инкубировать икру лосося и форели, но предварительно несколько модернизировав. Модернизация заключается в размещении внутри сосуда круглой металлической решетки с ячеей 2-3 мм у основания конуса, что позволяет равномерно омывать икринки водой, создавать условия покоя,предохраняя их от механического воздействия. Иногда на сетку практикуют помещать слой мелкого гравия.

В один аппарат Вейса объемом 8 л можно загружать до 45 тыс икринок форели. Расход воды может составлять 30 мл/с в начале инкубации и до 50-100 мл/с в завершающий период. Подача воды должна быть отрегулирована так, чтобы икра находилась в спокойном состоянии.

Применение аппаратов емкостью до 80 л позволяет инкубировать в одном аппарате до 750 тыс. икринок. Оснащение цеха аппаратами Вейса увеличивает его производительность в несколько раз и существенно экономит площадь инкубационного цеха, занимаемую аппаратами.

Аппарат Орава представляет собой металлический ящик прямоугольного сечения со съемной передней стенкой, герметически прикрепляемой при помощи болтов. Дно аппарата изготовлено из досок толщиной 5 см; в 5 см от дна с внутренней стороны боковых стенок укреплены две полосы из углового  железа – они служат опорой для рамок с икрой.

Вода в аппарат попадает через трубку, проходящую через центр дна. Для равномерного распределения  воды трубка заканчивается Т-образным наконечником. Аппарат устанавливается на брусках сечением 40 х 40 х 30 мм. После укладки рамок с икрой, переднюю стенку герметически закрепляют, включая воду. Мощность аппарата 130 тыс. икринок. Недостатком является отсутствие постоянного визуального наблюдения за инкубируемой икрой.

Учет закладываемой на инкубацию икры проводят весовым и объемным способом. Более удобным является объемный способ. Икру мерной емкостью раскладывают на инкубационные рамки аппаратов горизонтального типа в 1-2 слоя, а в вертикальных  – в 5-25 слоев.  После размещения икры еще раз окончательно отбирают погибшие икринки, проводят профилактическую обработку икры купанием в растворе формалина в концентрации 1:2000 при экспозиции 10 мин или раствором хлорамина в концентрации 1:30 000 при экспозиции 10 мин.

Для отбора мертвой икры используют специальные рыбоводные пинцеты, груши со стеклянной трубкой с внутренним диаметром не менее 5-8 мм, сифоны и другие устройства различной конструкции.

В инкубационные аппараты должна постоянно поступать  чистая, отстоянная (фильтрованная) вода требуемой температуры (6-120С), не содержащая взвесей, которые осаждаясь на икру затрудняют ее дыхание.

Если вода имеет большое количество взвесей, то следует  дополнительно устанавливать ватно-марлевые фильтры, которые периодически по мере загрязннения меняют.

При подогреве воды ведут строгий контроль за содержанием свободного азота, насыщение которого в период инкубации не должно превышать 105 %.

В период инкубации следят за обеспечением непрерывной подачей воды и ее качеством. Осуществляют контроль за температурой воды. Еженедельно определяют содержание растворенного в воде кислорода и солевой состав воды. При накоплении взвешенных частиц на икре ее необходимо промывать под слабой струей воды (из лейки) на стадиях пониженной чувствительности к механическим воздействиям  (табл 25). До стадии начала пигментации глаз промывание икры следует проводить только в случае крайней необходимости и с большой осторожностью

Таблица 25

Время наступления чувствительных стадий икры радужной форели при различной температуре воды, сут.

 

Стадия развития Температура воды, 0С

6810

Уплощение бластодиска 6 4 3

Начало гаструляции 7,5 5 4

Появление краевого узелка 12 7,5 4

Закрытие бластопора 16 11 9

Перед вылуплением 40 35 30

 

Таблица 26

Возможное время начала и окончания работ с икрой в период 

инкубации, сут

 

Стадия развития

икры Температура воды, 0 С

6810

До утолщения бластодиска 1-5 1-3 1-2

Обрастание желтка бластодермой 13-15 8-10 6-8

Рост хвостового отдела и пигментация глаз 19-39 16-34 12-29

Весь период развития до вылупления 43-47 37-42 31-34

 

Инкубация икры должна проходить в темноте, поэтому инкубационные аппараты закрывают крышками, окрашивают в темный цвет, затемняют помещение. Все рыбоводные операции (отбор икры, промывка, загрузка и др.) должны проводиться при слабой освещенности.

В период инкубации проверяют оплодотворяемость икры. Оплодотворенную икру от неоплодотворенной можно отличить на стадии дробления зародышевого диска, т.е. на 1-3 сут после оплодотворения. Неоплодотворенная икра имеет расплывчатый плоский зародышевый диск, неясно выраженные борозды дробления. Можно на стадии, характеризующейся началом пульсации сердца и обособления хвостовой части зародыша (через 90 – 110 градусо-дней при оптимальной  температуре)

Продолжительность инкубации икры находится в прямой зависимости от температуры воды: 101 день при 3,20С, 75 – 4,8, 44 – 7,5, 29 – 10,3, 27 – 11,5, 25 – 12, 21 – 14,5 и 18 дней при 15,50С.

Для этого пробу икры помещают в 5 % -ный  раствор уксусной кислоты с добавлением 7 г поваренной соли на 1 л раствора. В этом растворе оболочка икры обесцвечивается и в нормально оплодотворенной и развивающейся икре становится хорошо заметной белая полоска тела зародыша. Для этих же целей можно использовать жидкость Буэна или 10,7 %-ный раствор NaCl ( 960 г NaCl на 8 л воды), в котором неполноценная икра осаждается в течение 3 мин. Можно помещать икру в 12 %-ный солевой раствор, при этом погибшая икра всплывает, а живая остается на дне сосуда.

Для предупреждения поражения икры сапролегнией необходимо в процессе инкубации проводить периодические профилактические ванны в течение 10 мин формалином (1:2000), хлорамином (1:30 000) или малахитовым зеленым (1:150 000). Обрабатывать икру следует на второй день после закладки ее на инкубацию, а с момента начала пигментации глаз – 1-2 раза в неделю. Хорошо зарекомендовал себя метод обеззараживания воды с помощью бактерицидных установок, особенно при оборотном и циркуляционном использовании воды.

В период инкубации икры ведут ее учет, занося данные в  журнал, где регистрируют количество инкубируемой икры, дату закладки на инкубацию, отходы, начало и массовое вылупление и его завершение, профилактические мероприятия, температуру воды, содержание растворенного в воде кислорода и другие сведения о ходе инкубации.

Анализ результатов инкубации (на основании многолетних данных) позволяет надежно планировать производственный процесс.