4.2. Хранение коллекционных культур.


Коллекционные культуры (маточные культуры) хранятся в
жидком состоянии в пробирках или круглых плоскодонных колбах
объёмом 100-250 мл, установленных в ламинарном шкафу (рис. 100).


Рис. 100. Коллекция кормовых микроводорослей в питомнике ИнБЮМ.
В шкафу производится регулярная стерилизация воздуха,
поскольку одним из необходимых условий для содержания
коллекционного материала является исключение его загрязнения
микроорганизмами. Бактериальное загрязнение коллекционных
культур может вызвать в дальнейшем загрязнение стартовых и
массовых культур, что послужит причиной гибели личинок
моллюсков на ранних стадиях развития. Поэтому пересевы культур
должны осуществляться в специальных боксах, которые перед
работой стерилизуют не менее 20-30 минут с помощью
бактерицидных ламп. При отсутствии таких условий, пересев
альгологически чистых культур можно проводить непосредственно в
комнате без бокса над пламенем горелки или спиртовки.
Коллекционные культуры могут храниться в течение 1 - 2 недель.
318
Длительность выращивания культуры водорослей без пересева в
жидкой среде зависит от различных факторов: темпов роста
водорослей, запаса питательных элементов в среде, температуры
выращивания и т.п. Пересев культур золотистых и зеленых
микроводорослей осуществляется через 10 - 12 дней, диатомовых
через 7 дней.
При работе с коллекционными культурами необходимо
соблюдать определенные условия:
При работе с коллекционными культурами необходимо соблюдать определенные условия
стерильность помещения, посуды, питательных сред.
Посуду стерилизуют в сушильном шкафу при
температуре не ниже 120ºС; питательные среды
стерилизуют в автоклаве согласно общепринятым
правилам;


при работе с различными типами водорослей
(диатомовые, золотистые, зеленые) культивирование
желательно проводить в изолированных отсеках, чтобы
не загрязнять посевы других культур при совместном
выращивании; если такой возможности нет,
целесообразно пересеивать водоросли в разные дни.
Маточные культуры хранятся при температуре 4-12ºС, и при
интенсивности света не более 1 клк, без аэрации и добавления
углекислого газа. Их можно поддерживать как на жидких
питательных средах (среда Конвея и среда F/2), так и на твердых
агаризованных средах.
При хранении на агаризованной питательной среде небольшой
объём культуры высевают в чашку Петри и распределяют посев по
всей её поверхности. Чашку помещают на свет для роста, а при
необходимости микроводоросли снова переводят на жидкую
питательную среду. При таких условиях выращивания, культуры
длительное время могут находиться в хорошем физиологическом
состоянии. Обычно для хранения водорослей на агаризованных
средах используют холодильный шкаф с температурой 4-12°С,
освещаемый слабым источником света 300-500 люкс. На такой среде
микроводоросли можно хранить в течение 3-х месяцев. На
агаризованных средах водоросли растут медленнее, чем на жидких.
Длительно выдерживать водоросли без пересева не
рекомендуется, так как даже на не богатой питательной среде они
319
могут прекратить рост в результате самоотравления продуктами
жизнедеятельности. Признаками угнетения жизнедеятельности и
прекращения роста могут быть пожелтение культуры, появление
белесого оттенка или её помутнение.
Основное назначение коллекционных культур - обеспечение
качественных линий стартовых культур.