4.3. Подготовка стартовых культур.


Через 1-2 недели маточные культуры переводят в стартовые
(инокулят). Для этого 200-300 мл коллекционной культуры
помещают в колбу объёмом 2 л, добавляют питательную среду и
переносят на световую решетку для дальнейшего наращивания.
Процесс культивирования стартовых культур проходит при
температуре 20-22ºС, интенсивности света 5 тыс. люкс и постоянной
аэрации воздухом. Объём пересеваемой маточной культуры можно
увеличивать, это позволит быстрее получить максимальную
плотность стартовой культуры и сократить время ее
культивирования. Основная задача стартовых культур - получение
инокулята за короткий промежуток времени с целью его
дальнейшего использования для массового культивирования
микроводорослей.
Для наращивания стартовых культур необходимо иметь
специальные стеллажи (желательно металлические) со стеклянными
полками, которые оборудованы лампами дневного света (рис. 101).
Лампы устанавливаются над верхней полкой, а также под каждой
ниже следующей.
Культивирование водорослей происходит в течение 7-10 дней на
питательной среде Конвея с повышенным содержанием железа.
Железо занимает промежуточное положение между макро- и
микроэлементами. Потребность водорослей в железе ниже, чем в
азоте и фосфоре, но выше, чем в других микроэлементах. В процессе
фотосинтеза железо выполняет важную регуляторную роль, так как
входит в состав многих ферментов. Железосодержащие белки
принимают участие в окислительно-восстановительных реакциях
фотосинтеза, дыхания и углеродного обмена. Отсутствие или
недостаток железа в питательных средах вызывает значительное


уменьшение продуктивности микроводорослей вследствие угнетения
фотосинтетической активности, задерживает рост клеток и
уменьшает количество хлорофилла.

Наращивание стартовых культур в питомнике ИнБЮМ
Рис. 101. Наращивание стартовых культур в питомнике ИнБЮМ.
Стартовые культуры, в зависимости от видовой принадлежности,
вырастают в течение разных промежутков времени. Так, для
диатомовых и золотистых водорослей этот период составляет 5-7
дней, а для зеленых водорослей – 10 дней. Наращивание инокулята
необходимо продолжать до достижения сухой биомассы водорослей
0,3 г/л, 0,7 г/л и 0,5 г/л соответственно для I. galbana, D. viridis и P.
tricornutum. В это время водоросли находятся в логарифмической
фазе роста и достигают высокой плотности. Далее 1/3 часть их
объёма используют для начала выращивания новой стартовой
культуры, а остальную - для наращивания больших объёмов
микроводорослей (массовое культивирование).